中药组方对猪繁殖与呼吸综合征防控效果的评价

1.6 临床指标观察

阳性对照组和用药组与已知PRRSV阳性猪同群饲喂开始记为试验第1天，连续14 d观察并记录试验仔猪的精神状态、采食量、体温、死亡率等临床指标。

1.7 临床材料采集

对两批试验仔猪试验第7、10、13天进行耳缘静脉采血，做好相关记录；14 d后采集肺脏、脾脏、淋巴结等组织进行研磨，并做好分组相关记录，8 000 r/min 离心10 min，分离组织研磨液上清，置于-20℃备用。

1.8 PRRSV检测

对于试验进行第7、10、13天采集的血液，使用DNA/RNA核酸提取及纯化试剂盒提取核酸，通过实时荧光定量RT-PCR检测血液中PRRS病毒血症情况；对于分离的感染14 d组织研磨液上清，使用DNA/RNA核酸提取及纯化试剂盒提取核酸，通过实时荧光RT-PCR检测组织中PRRSV病毒载量。

2 试验结果

2.1 试验动物检测结果

对18头25日龄断奶仔猪，分别使用实时荧光定量RT-PCR及实时荧光定量PCR检测试剂盒进行PRRSV、JPEV、CSFV、PPV、PRV和PCV2检测，结果显示PRRSV、JPEV、CSFV、PPV、PRV和PCV2均为阴性（表1）；使用PRRSV ELISA抗体检测试剂盒进行PRRSV抗体检测，结果显示18头试验仔猪PRRSV抗体阴性（表2），表明该18头仔猪可用于试验。

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