4.2染色镜检 挑取单菌落,进行革兰氏染色镜检。革兰氏染色镜检可见两端钝圆或卵圆形,不运动,不形成芽孢和荚膜的革兰氏阴性小杆菌,符合沙门氏菌染色特征。 4.3 PCR扩增 挑取单菌落,LB液体培养基37℃震荡培养12-16h,通用引物(P1:AGAGTTTGATCCTGGCTCAG,P2:GGTTACCTTGTTACGACTT)进行菌液PCR扩增。PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,可见一条大小在1500bp左右单一的条带。 4.4测序鉴定 将分离株PCR扩增产物送上海生工测序,测序结果经NCBI比对确定为猪沙门氏菌。 4.5药敏实验 采用琼脂纸片扩增法,用灭菌棉拭子将培养的分离株菌液均匀涂布于琼脂平板上,将药敏纸片贴到培养基表面,37℃培养16-18h,药敏结果见下表。可见分离的猪沙门氏菌对链霉素、新霉素、多西环素、头孢噻呋、氧氟沙星、头孢曲松、丁胺卡那敏感,对林可霉素、氟苯尼考、阿莫西林、土霉素等耐药。
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