兽药园地
板蓝根多糖的提取及含量测定
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结果见表1 表1不同浓度葡萄糖的吸光度 葡萄糖标准液(ml) 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 浓度(ug/ml) 0.00 1.05 2.10 3.15 4.20 5.25 6.30 7.35 吸光度值A 0.000 0.0735 0.1458 0.2235 0.2945 0.3798 0.4420 0.4973 3 多糖的提取及精制 取板蓝根洗净，晾干，精密称取100g，置索氏提取器中，依次用石油醚（60～90°C）、乙醚和80%乙醇回流提取4h。残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤，得板蓝根多糖。60°C烘干备用。 4 换算因素测定 精确称取60°C干燥恒重的板蓝根多糖20mg，水溶解后定容到100ml量瓶中，摇均，作为多糖储备液。 精确量取多糖储备液0.2ml，加水至1ml，按测定标准曲线同样的方法测其吸光度值。按下式计算换算因素。 f=W/CD 式中：W为多糖重量(ug)，C为多糖液中葡萄糖的重量(ug)，D为多糖的稀释倍数。测得f=4.7829。 5样品测定 精确分别称取板蓝根粉未0.2g、0.201g、0.203g，用80%乙醇回流2h，残渣挥去溶剂后，继续用水回流2h，反复洗至250ml量瓶中，定容，摇匀成为样品液。测定时，精确吸取样品液1ml，按测定标准曲线同样方法测其吸光度值，按下式计算多糖含量： 多糖含量%=CDf/W*100% 式中：C为样品溶液的葡萄糖的重量(ug),D为样品溶液的稀释倍数，f为换算因素，W为样品的重量(ug)，测得平均结果为0.8099%=0.28%(n=3) 6 回收率测定 精密称取板蓝根粉未0.15g，精密加入板蓝根多糖7mg，再于索氏提取器中用80%乙醇回流2h，残渣挥去溶剂后，连续用水回流2h，反复洗至250ml量瓶中定容。摇匀后，清确移取1ml，按测定标准曲线进行提取和测定。计算多糖含量，平均回收率为98.74%,RSD=1.86%(n=5)。 7 讨论 多糖广泛存在于自然界，是多种中草药的有效成分之一，具有多种生物活性，是理想的免疫增强剂，它能提高机体免疫系统的功能，不仅能促进T细胞、B细胞、NK细胞、M细胞等免疫细胞的功能，还能促进白间素、干扰素、肿瘤坏死因子等细胞因子的产生。目前对多糖的研究方兴未艾，多糖的作用机理以及生物功能与结构的关系的研究不断深入，而且不断有新的多糖物质被发现。我们从板蓝根中提取出板蓝根多糖，并对其含量进行了测定。研究表明，板蓝根多糖含量不是很高，提取方法有待进一步改进。板蓝根多糖的结构组成和生理活性也有待进一步研究。 |
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