猪支原体肺炎的诊断及防控

更多的研究则通过PCR检测技术调查区域内M.hyo的流行情况，如Pacce通过屠宰场内肺脏采样监测发现巴西国内M.hyo的检出率高达90%以上；而Vicente通过屠宰场血清阳性率调查得出数据只有52%。这也反映出PCR检测相对血清抗体检测而言有更高的准确性。

M.hyo疫苗的免疫可以减轻感染引起的临床症状、降低疾病造成的经济损失，但不能阻止野毒继续感染，通过PCR检测野毒阳性率评估疫苗免疫的效果并不是一个好选择。

以上两种病原检测法在疾病相关的调查中更有价值，但M.hyo的感染致病是病原侵袭和机体反侵袭、调用免疫系统应答，M.hyo致免疫细胞凋亡继而产生病变等一系列复杂的过程。在PRDC等呼吸道病原混合感染过程中，其他病毒、细菌等病原相互作用，疾病的进程更加变化多端。通过临床症状、剖检诊断、血清抗体监测及病理组织学检查可以从机体应答的层面得出，除了病原外的对疾病更直接关联的信息，来指导临床施治和评估施治方案的效果。

3、临床症状和剖检诊断

只由M.hyo感染引起的慢性呼吸道病以非连续性的干咳为主，猪只体温不会升高，引起的肺部病变在3个月左右可以自行吸收恢复，但通常会留有疤痕，死亡率不高。当猪只表现出发烧、腹式呼吸时则表示出现了继发或混合感染，地方流行性肺炎和呼吸道疾病综合征都可出现更严重的临床症状，最终导致高死亡率。剖检诊断通常针对死亡不久或濒死没有饲养价值的猪只，M.hyo感染造成的肺部病变很典型，病原感染引起的炎症反应及淋巴细胞的挤压、凋亡等会导致肺尖叶、心叶甚至膈叶出现对称性的肉样变，与正常肺组织界限明显，触摸无气胀感。临床症状和剖检诊断是疾病诊断的第一步，依据典型病变可以判定猪群在特定阶段存在M.hyo感染，但致死的主要原因还要结合其他病变的诊断和后续的检测进行确认。因小日龄猪只肺部病变还存在再吸收的可能，所以育肥猪和到屠宰上市猪只肺部肉样变更能反映猪群真实的支原体病变情况。

剖检过程中肺部尖叶、心叶之间注意是否有纤维丝状粘连，即使没有看到典型肉样变，出现这类粘连表明支原体的早期感染，病变在积蓄形成中。对于保育猪只的临床剖检特别要留意这种现象。

通过咳嗽、呼吸困难等症状评估疫苗免疫效果在现阶段国内复杂的临床现状下很难做到客观判断，除了猪舍条件、通风的影响外，PRRSV、PCV2、猪伪狂犬病毒（PRV）等的感染都会导致咳嗽等呼吸道症状。辅以药物治疗性诊断有一定的价值，通常病毒感染引起的临床症状无法通过添加药物快速消除。

4、血清学诊断技术

血清学诊断技术是一种比较好的针对群体采样、评估疾病感染及免疫应答效率的方法。

目前在售的有多款对M.hyo的抗体检测试剂盒。但血清学诊断是基于体液免疫应答的抗原抗体反应，M.hyo感染定植在呼吸道，极少进入血液、淋巴循环系统，即使刺激机体产生了抗体，体液中的高水平抗体也无法接触到病原产生中和作用。所以ELISA检测试剂盒检测到的抗体水平无法反应疫苗免疫的保护效果。但作为未免疫猪群血清流行病学调查可以提供参考，其准确率低于PCR检测，但不失为一种成本低、数据量大的调查方法。

M.hyo的基因组含有近700个开放阅读框，232毒株在体外培养时实际表达的蛋白约480种， 由于毒株差异、疫苗培养工艺不同，M.hyo全菌灭活苗会存在抗原表达丰度的差异。以对M.hyo定植有重要作用的膜表面蛋白为例，目前已知的定植膜蛋白种类有35种，很难通过几种蛋白的组合免疫就能起到良好的免疫效果，全菌疫苗由于抗原表达丰度的差异也不一定面面俱到地刺激产生不同蛋白的抗体。生产实践中，通过同一种试剂盒检测不同M.hyo疫苗免疫4周后的抗体阳性率在30%～100%之间。寻找更加保守的蛋白靶标，通过灵敏度更高的ELISA方法可以缩小这种差异，为疫苗免疫效率评估提供指导。

近期IDVet公司开发了一款基于P65蛋白的阻断ELISA试剂盒，在监测猪只血清抗体时表现出了良好的特异性和敏感度，通过对免疫后不同日龄抗体阳性率的监测以及相同日龄不同血清稀释度抗体水平的测定，可以从质和量上对疫苗免疫应答的效率做出评估。这为M.hyo疫苗免疫效率的评估提供了一种周期短、可量化的指标。结合反应实际保护效果的屠宰场肺部病变评分可以更加客观地反应疫苗的免疫应答质量。

5、组织病理、免疫组化检测

可采用标记抗体对在气管、支气管等组织切片上的M.hyo病原进行检测，M.hyo很少造成致死性病变，临床诊断并不困难，生产实践中很少使用。

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