(三)种牛羊场 1. 场点选择。18个省(自治区、直辖市)的21个国家肉牛核心育种场/动物疫病净化创建场、15个肉羊核心育种场/动物疫病净化创建场(见附表3-1)。 2. 采样数量。每个种牛/种羊场采集牛/羊血清样品40份,对应种牛眼/鼻/直肠拭子40份,对应种羊眼/鼻拭子40份,对应种公牛/种公羊精液5份,以及国外进口牛/羊冷冻精液3份冷冻。 3. 样品要求 所采集的血清和拭子样品应一一对应,样品来源原则上不少于3栋牛舍/羊舍,采样时应兼顾育成牛/羊和繁殖牛/羊的比例。 ①血清样品。每份采集3-5mL全血,凝固后析出血清不少于1.5mL,用2mL离心管冷冻保存。 ②拭子样品。同一个体的拭子放在同一个5mL离心管中,加保存液约2.5mL,冷冻保存。 ③精液样品。每份采集2mL,冷冻保存。 4. 样品编号。牛血清样品以“BX1~BXn”模式编写,牛眼/鼻/直肠拭子以“BS1~BSn”模式编写,牛精液样品以“BJ1~-BJn”模式编写,同一头牛的血清样品与眼/鼻/直肠拭子样品编号一一对应。羊血清样品以“CX1~CXn”模式编写,羊眼/鼻拭子以“CS1~CSn”模式编写,羊精液样品以“CJ1~CJn”模式编写,同一只羊的血清样品与眼/鼻拭子样品编号一一对应。 (四)采样信息填报 1. 样品信息。采样同时填写《种猪场/种公猪站采样记录表》见附表1-2,《种禽场采样记录表》见附表2-4,《种牛场采样记录表》见附表3-2,《种羊场采样记录表》见附表3-3),同时录入电子表格(请在中国兽医网下载),并发送至邮箱zxqjcxx2017@163.com。如因特殊情况无法采购上述数量样品,需在《采样记录表》上注明原因并经种场负责人签字确认。 2. 种场信息。采样同时调查该场养殖、防疫信息,填写表格包括《种畜禽场监测调查表(猪)》、《种畜禽场监测调查表(鸡)》、《种畜禽场监测调查表(鸭/鹅)》、《种畜禽场监测调查表(牛)》、《种畜禽场监测调查表(羊)》(请在中国兽医网下载),并发送至邮箱zxqjcxx2017@163.com。 六、样品检测 (一)原种猪场/种公猪站 检测猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、伪狂犬病、猪圆环病毒病、猪细小病毒病5种主要垂直传播性动物疫病9个项目。具体检测项目及方法见表1。必要时抽取部分样品进行病毒分离鉴定和基因序列测定,调查病原变异情况。 表1 原种猪场检测项目及其方法 序号 | 检测病种 | 检测项目 | 样品类型 | 检测方法 | 1 | 猪繁殖与呼吸综合征 | PRRSV(通用) | 扁桃体、精液 | RT-PCR | 2 | HP-PRRSV(变异株) | 扁桃体、精液 | RT-PCR | 3 | PRRSV抗体 | 血清 | ELISA | 4 | 猪瘟 | CSFV | 扁桃体、精液 | RT-PCR | 5 | CSFV抗体 | 血清 | ELISA | 6 | 伪狂犬病 | PRV-gE抗体 | 血清 | ELISA | 7 | PRV-gB抗体 | 血清 | ELISA | 8 | 猪圆环病毒病 | PCV | 扁桃体、精液 | PCR | 9 | 猪细小病毒病 | PPV | 扁桃体、精液 | PCR |
|