附件2 诊断方法
一、诊断方法
（一）临床症状与病理剖检
1.临床症状
布病典型症状是怀孕母畜流产。乳腺炎也是常见症状之一，可发生于妊娠母牛的任何时期。流产后可能发生胎衣滞留和子宫内膜炎，多见从阴道流出污秽不洁、恶臭的分泌物。新发病的畜群流产较多。公畜往往发生睾丸炎、附睾炎或关节炎。
2.病理变化
主要病变为妊娠或流产母畜子宫内膜和胎衣的炎性浸润、渗出、出血及坏死，有的可见关节炎。胎儿主要呈败血症病变，浆膜和黏膜有出血点和出血斑，皮下结缔组织发生浆液性、出血性炎症。组织学检查可见脾、淋巴结、肝、肾等器官形成特征性肉芽肿。
（二）实验室诊断
1.血清学诊断
初筛采用虎红平板凝集试验（RBT）（GB/T18646），也可采用荧光偏振试验（FPA）和全乳环状试验（MRT）（GB/T18646）。确诊采用试管凝集试验（SAT）（GB/T18646），也可采用补体结合试验（CFT）（GB/T18646）、间接酶联免疫吸附试验（iELISA）和竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）。
2.病原学诊断
（1）显微镜检查，采集流产胎衣、绒毛膜水肿液、肝、脾、淋巴结、胎儿胃内容物等组织，制成抹片，用柯兹罗夫斯基染色法染色，镜检，布鲁氏菌为红色球杆状，而其它菌为蓝色。
（2）PCR 等分子生物学诊断方法。
（3）细菌的分离培养与鉴定。该实验活动必须在生物安全三级实验室进行。
二、结果判定
根据临床症状和病理变化，判定为疑似患病动物，如确诊应当进一步采样送实验室检测。
对于未免疫动物，血清学确诊为阳性的，判定为患病动物；若初筛诊断为阳性的，确诊诊断为阴性的，应在 30天后重新采样检测，复检结果阳性的判定为患病动物，结果阴性的判定为健康动物。
对于免疫动物，在免疫抗体消失后，血清学确诊为阳性的，或病原学检测方法结果为阳性的，判断为患病动物。
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