对存栏量大于100头(只)的场群,进行全覆盖采样,场群内基于以往流行率抽样,每场群采样量不少于30头(只)。对存栏量小于100头(只)的场群,抽样场群数由各级动物疫病预防控制机构根据辖区情况自行确定,场群内基于以往流行率抽样,每场群采样量不少于30头(只),不足30头(只)的全采。 4.其他场群(自然村)。抽样场群(自然村)数由各级动物疫病预防控制中心根据辖区情况自行确定,每场群(自然村)采样量不少于30头(只)。 各市、县(市、区)动物疫病预防控制机构按照相关要求做好布菌净化场和无疫小区省级和国家级评估前的监督监测工作。 (二)临床病例报告。任何单位和个人发现牛羊出现流产、死胎等临床异常情况且诊断为临床病例的,应及时向当地农业农村部门或动物疫病预防控制中心报告,动物疫病预防控制中心应及时采样进行监测,采样和检测时应做好生物安全防护。 七、检测方法 (一)凝集类试验。血清学检测方法主要包括虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)和全乳环状凝集试验(MRT)。 (二)ELISA。包括间接ELISA和竞争ELISA。 (三)其他试验。包括荧光偏振试验(FPA)和动物布鲁氏菌抗体荧光免疫层析检测法。 初筛可采用虎红平板凝集试验(RBT) (GB/T18646)、荧光偏振试验(FPA)、全乳环状试验(MRT) (GB/T18646),间接酶联免疫吸附试验(iELISA)以及动物布鲁氏菌抗体荧光免疫层析检测法(T/CVMA 22-2020)。确诊可选用试管凝集试验(SAT)(GB/T18646)和竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)。 (四)病原检测。采样PCR或细菌分离培养检测方法。 八、结果判定 (一)患病动物及健康动物个体确定。对于未免疫动物,血清学确诊为阳性的,判定为患病动物;若初筛诊断为阳性的,确诊诊断为阴性的,应在30天后重新采样检测,复检结果阳性的判定为患病动物,结果阴性的判定为健康动物。 对于免疫动物,在免疫抗体消失后,血清学确诊为阳性的,或病原学检测方法结果为阳性的,判断为患病动物。 (二)阳性群体。至少检出1个确诊患病动物的场群/群体。 (三)临床病例处置。按照布鲁氏菌病防治技术规范处置。 附件5 牛结核病监测计划 一、监测目的 发现感染牛分枝杆菌的乳用、种用牛;掌握牛结核病流行情况;提出防控建议措施,推动净化工作。 二、监测对象 所有乳用牛和种用牛。 三、监测时间 各地根据实际情况随时安排监测,但需在11月15日前报送不低于规定数量的监测结果。 四、监测数量 各地监测任务数量见附件19。 各市、县(市、区)动物疫病预防控制中心做好结核病净化场和无疫小区省级和国家级评估前的监督监测工作,监测数量按照相关要求执行。 五、检测方法 (一)初筛。可采用牛分枝杆菌结合菌素试验(PPD)、高敏荧光免疫分析法进行检测 (二)确诊。可采用外周血γ干扰素体外释放检测法进行确诊。对皮内变态反应检测阳性的动物,45天后用牛分枝杆菌和禽分枝杆菌PPD在颈部两侧或颈部同侧相距12—15cm的两个部位进行比较皮内变态反应试验(GB/T 18645-2020)复检,或用外周血γ干扰素体外释放检测法(按试剂盒说明书)复检。对高敏荧光免疫分析法检测阳性的动物,可用外周血γ干扰素体外释放检测法复检。 五、结果判定和阳性动物处理 皮内变态反应复检阳性牛或外周血γ干扰素体外释放检测法检测阳性牛,判定为结核病牛。按照《牛结核病防治技术规范》对阳性动物进行扑杀和无害化处理;隔离阳性场/群,定期进行跟踪检测。发现可疑病例,及时隔离复检。 |