荧光PCR常见异常结果分析汇总（图）

2.5.2常见原因：该孔有异物；温度或荧光信号采集异常；该检测的反应体系中存在抑制物；提取核酸失败；样本采集不合格；样本/核酸漏加。

2.5.3解决方案：打开PCR仪盖，查看孔内是否有异物，假如有异物，用镊子夹出异物，或用洗耳球吹出异物；分析前一批结果中，该孔内标是否扩增，假如连续两次内标无扩增，考虑该孔温度异常或荧光信号采集异常，需要进行校准或报修。排除以上情况后，对原标本复检，若内标正常可以正常发报告；若内标仍然无扩增，则需重新采样复检。

2.6案例6

2.6.1现象：外源性内标曲线异常

外源性加入的内标均一性较好（如G行12孔均有内标曲线，且其CT值均一，见下图）

但工作中有时会发现同一排或同一行中内标比较离散，甚至有多个内标不起（如F行的F7、F9、F10、F11孔均无内标曲线，无CT值，其余各孔CT值比较离散，见下图）

2.6.2常见原因：①排枪与枪头不匹配，结合不严密，导致加样量不足/不均一；②使用排枪吸取内标混合液时，液体堵住了部分枪头滤芯，导致向裂解板加样时加样量不均一，甚至部分孔没有液体加入。

2.6.3解决方案：建议使用配套量程的枪头，移液器要慢放慢吸；分装试剂和加样时仔细观察液体是否打出。

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