牧医图谱

荧光PCR常见异常结果分析汇总(图)

日期:01-08 作者:佚名- 小 + 大

2.5.2常见原因:该孔有异物;温度或荧光信号采集异常;该检测的反应体系中存在抑制物;提取核酸失败;样本采集不合格;样本/核酸漏加。

2.5.3解决方案:打开PCR仪盖,查看孔内是否有异物,假如有异物,用镊子夹出异物,或用洗耳球吹出异物;分析前一批结果中,该孔内标是否扩增,假如连续两次内标无扩增,考虑该孔温度异常或荧光信号采集异常,需要进行校准或报修。排除以上情况后,对原标本复检,若内标正常可以正常发报告;若内标仍然无扩增,则需重新采样复检。

2.6案例6

2.6.1现象:外源性内标曲线异常

外源性加入的内标均一性较好(如G行12孔均有内标曲线,且其CT值均一,见下图)

但工作中有时会发现同一排或同一行中内标比较离散,甚至有多个内标不起(如F行的F7、F9、F10、F11孔均无内标曲线,无CT值,其余各孔CT值比较离散,见下图)

2.6.2常见原因:①排枪与枪头不匹配,结合不严密,导致加样量不足/不均一;②使用排枪吸取内标混合液时,液体堵住了部分枪头滤芯,导致向裂解板加样时加样量不均一,甚至部分孔没有液体加入。

2.6.3解决方案:建议使用配套量程的枪头,移液器要慢放慢吸;分装试剂和加样时仔细观察液体是否打出。

上一篇:猪布氏杆菌病的诊治(图)

下一篇:冬季猪场呼吸道疾病综合征的防治(图)

网站地图 | 服务条款 | 联系方式 | 关于阳光

冀ICP备14003538号  |   QQ:472413691  |  地址:河北省邢台市  |  电话:0319—3163003  |  

Copyright © 2024 天人文章管理系统 授权使用


首页
分享
留言 搜索 我的