2.2.3 生物法 大量的研究证实,生物脱毒法是最有效的方法,主要包括微生物降解和酶解两种。微生物对霉菌毒素的解毒机理包括发生在菌体内的生化反应、代谢物(酶等)的分解作用以及菌体对毒素的吸附作用等。霉菌毒素的生物解毒和脱毒法主要包括微生物降解和酶解两种,具有特异性强、安全、高效、环境友好等优点,是当前消除霉菌毒素危害最有效的方法。一般而言,一种微生物或一种酶可能会针对某一种霉菌毒素具有良好的降解作用,要想得到对多种霉菌毒素都具有良好的降解作用,就需要多种菌、多种酶或多种菌与多种酶的配合。 许多研究发现,微生物包括细菌、酵母菌、真菌和放线菌等都能降解食品和饲料中的霉菌毒素。降解霉菌毒素所选用的微生物,主要是国家农业农村部发布的允许添加到饲料中的益生菌,益生菌发酵或产生一些特殊的物质可以打破毒素的结构,进而转化为低毒或者无毒物质。Shetty等筛选到两株酿酒酵母菌,能够吸附36%以上的AFB1,并提出起吸附作用的是其细胞壁上的碳水化合物或甘露聚糖。刘畅筛选出了一株对AFB1吸附率高达81.16%的酿酒酵母。郑文秀等将酪丁酸梭菌菌株连续驯化培养50代后对ZEA的吸附率可达98.5%。赵雪芹等选择米曲霉、迟缓芽孢杆菌等6种益生菌来降解ZEA和DON,结果表明迟缓芽孢杆菌对DON降解率达到79.59%,对ZEA降解率达到46.93%,通过检测发现ZEA的降解产物的毒性都低于DON。另据报道,厌氧优杆菌属细菌BBSH797和诺卡氏细菌WSN05-2可有效地降低DON毒性。Repecdkiene等用四种不同酵母菌降解小麦面粉和配合料中黄曲霉毒素、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮,结果表明四种酵母菌皆能够降解AFB1、ZEA和DON。朱新贵等将枯草芽孢杆菌、乳酸菌、醋酸菌与黄曲霉毒素液体培养60 h后,三种微生物对AFB1的降解率皆在80%以上。 降解霉菌毒素所选用的酶制剂有多种类型,Khatibi等将3-O-乙酰基转移酶基因片段克隆到酵母菌中,发现可有效地降低燃料乙醇发酵副产物中DON含量。胡常英等在小鸡饲粮或饮用水中加入葡萄糖氧化酶后,其存活率明显升高,无其他不良现象。Das等研究证明了过氧化氢酶能够降解 AFB1并且其降解率与酶量有关。王会娟等筛选到了两株降解黄曲霉毒素的漆酶菌株。Liu等和左振宇等从Armillariella tabescens中分离出可以降解AFB1毒性的黄曲霉毒素降解酶,并扩增出AFB1降解酶基因并最终在酵母菌中得到表达。Teniola等报道从Rhodococcus erythropolis和Mycobacterium fluoranthenivorans的发酵液及细胞中提取的胞内酶均具有较高的降解黄曲霉毒素的能力。Igawa等寻找到控制产生脱毒作用的ZEA内酯水解酶基因(zhd101),并在植物中表达了该基因,这样在作物收获前就可以限制ZEA的产生,可以从根本上解决霉菌毒素的污染问题,是未来作物育种的研究方向。 围绕单一及多种霉菌毒素的生物降解,本研究室也进行了大量的研究,证明利用多种益生菌组合,与植物提取物或与来自真菌分泌的霉菌毒素降解酶配伍,可有效地同步降解多种霉菌毒素,并证明霉菌毒素的生物降解产物无细胞毒性,降低了霉菌毒素对畜禽的危害。 由于饲料中霉菌毒素的污染不可避免,所以大家普遍关注霉菌毒素脱毒剂和解毒剂的研究与应用,造成产品种类繁多、质量参差不齐。当前,国内外在这方面还没有制定相关的质量标准,这就需要用户慎重选择。除利用霉菌毒素检测试剂盒,对霉菌毒素体外降解进行快速检测外,重点要观察霉菌毒素脱毒剂和解毒剂对动物生产性能的促进作用及健康的保护作用。目前,国内外关于霉菌毒素生物降解的实验室研究较多,其产业化还受到微生物及霉菌毒素降解酶的品种、特性、功能、配伍和生产工艺等条件的限制,需要深入研究。另外,霉菌毒素生物降解的中间产物及终产物的毒性有待于进一步的分析,为霉菌毒素生物降解剂的推广应用提供理论依据。相信在不远的将来,霉菌毒素的生物降解将会在饲料工业中发挥更重要的作用,为畜禽健康养殖提供安全和有效的解决方法。 |
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