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动物源性食品中有害化学物质及污染物的检测——孔雀石绿

日期:10-28 作者:曲志娜 赵思俊等- 小 + 大

4.1毒性机理

由图7-30可以看出,孔雀石绿分子中与苯基相连的亚甲基和次甲基受苯环影响有较高的反应活性,可生成自由基三苯甲基,这些孔雀石绿的代谢产物衍生物及初级和次级的代谢产物具有与致癌芳香胺类似的结构,研究证实这类分子进入人体后,会穿透细胞膜,到达细胞核中的DNA,很容易产生活泼的亲电子“阳氮离子”,攻击DNA上的亲核位置,相互以共价键结合,从而破坏DNA,引起癌变。除此之外,芳香胺分子的扁平部分还会“插入”正常细胞中DNA的螺旋线结构的相邻基本对之间,破坏DNA,引起癌变。另外,无色孔雀石绿进一步代谢阻碍甲状腺激素的合成,降低四碘甲状腺原氨酸(T4)、增加甲状腺刺激激素(TSH)浓度,诱发甲状腺细胞肿瘤的生成。

4.2对水生动物的毒性

相关研究表明孔雀石绿的毒性较强,对水生动物的安全浓度较低。如对翘嘴红铂鱼苗、虹鳟鱼苗、加州鲈苗和对虾虾苗的安全浓度分别为0.031mg/L、0.025mg/L、0.02mg/L和0.01mg/L,这比孔雀石绿的有效用药浓度0.10~0.20mg/L低,因此对上述水产养殖动物使用孔雀石绿是不安全的。研究还发现,孔雀石绿和无色孔雀石绿对鱼类的毒性随着暴露时间、温度和浓度的增加而增强,另外毒性也与环境因素,特别是pH、硬度和溶解氧的多少有关。

Gluth和Bills详细研究了孔雀石绿对不同成年鱼和幼鱼的LD50,其范围在0.045~9.100mg/L。影响因素包括pH、水温和染料作用时间。研究表明,水温上升可引起孔雀石绿的毒性作用增强,这与Alderman和Polglase的报道相符。

Wright评价了孔雀石绿对大口鲈和鲑鱼卵及鱼苗的致死率。结果表明,孔雀石绿的浓度增加1倍,其致死率可增加20倍,因而可以认为孔雀石绿是一种剧毒物,应禁止用于大口鲈鱼卵和幼鱼的生产。Wright还研究了孔雀石绿短期或长期暴露于淡水鱼后的毒性影响。孔雀石绿用于虹鳟后可导致基因突变、癌症、染色体破碎、畸形和繁殖能力下降,虹鳟长期暴露于孔雀石绿后发现鱼卵发育异常,受精38h后胚胎存活率显著下降,孵化时间延长,脊柱、头、鳍和尾发育异常。孔雀石绿对呼吸系统酶有毒性影响,可导致虹鳟和罗非鱼的呼吸失调。美国FDA将孔雀石绿列为致癌敏感化合物。

组织病理学研究发现,孔雀石绿对肝、腮、肾、肠、性腺和垂体促性腺细胞有严重的影响;孔雀石绿可导致肝脏局部坏死,引起肾近曲小管上皮细胞的增生、肾小球萎缩、肾被膜破裂、细胞坏死、核破裂、核溶解、核固缩。孔雀石绿也可导致肠坏死与剥落,肠上皮细胞退化,杯形细胞增生;肠绒毛稍破裂,黏膜折叠破裂,肌肉和绒毛膜变形、变性。在急性、亚急性和亚致死浓度下,鲶垂体促性腺细胞活性受到抑制,性腺退化。

血液生理生化研究发现,孔雀石绿可引起虹鳟等鱼类血液参数的变化,如贫血,血球容积、红细胞和白细胞减少,血球蛋白含量降低,血凝固时间延长。淡水鲶暴露于孔雀石绿3d后,红细胞和血红蛋白数增加,白细胞减少。Bills和Hunn否认孔雀石绿会对银大马哈鱼的血液生理生化产生不良的影响,但在急性、亚急性和致死浓度下,还是发现Heteropnerstes fossilis的血液生化参数有明显的变化。在0.1mg/L孔雀石绿中暴露20d,鱼血液中钙和蛋白质含量明显下降,鲶血液总胆固醇含量增加,罗非鱼血液磷和钙含量下降。鲶暴露于孔雀石绿后,碳水化合物和渗透压调节紊乱。孔雀石绿可导致肝脏和肌肉糖分解紊乱,并伴随高血糖和高胆固醇;还导致某些鱼体内缺氧,蛋白质合成能力减弱。

文琛等应用MTT法测定孔雀石绿对鲤上皮癌细胞(EPC)、草鱼肾细胞(CIK)、斑点叉尾卵巢细胞(CCO)的急性毒性。测定孔雀石绿的细胞毒性,发现MTT还原量减少,甲瓒生成量与孔雀石绿浓度存在依赖关系,孔雀石绿浓度越大,活细胞越少,甲瓒生成量也相应减少。以2×104接种量对EPC、CIK、CCO进行24h染毒,发现随着孔雀石绿浓度的增高,细胞存活率减少,而且在3种细胞中,CIK对于孔雀石绿的作用最敏感。

4.3对人和哺乳动物的毒性

孔雀石绿对哺乳动物细胞具有高毒性,孔雀石绿能引起动物食物摄入量、生长速度和生殖能力的降低,导致肝、肾、心脏、脾、肺等脏器中毒,造成皮肤、眼睛、肺和骨骼的损害。Culp等试验发现孔雀石绿与无色孔雀石绿均能使大鼠肝细胞空泡化,无色孔雀石绿还能使甲状腺滤泡上皮大量凋亡,减少公鼠甲状腺激素的释放;还能抑制血浆胆碱酯酶的作用,进而有可能造成乙酰胆碱的蓄积而出现神经症状。

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