动物源性食品中细菌的检测——副溶血性弧菌

副溶血性弧菌（Vibrio parahemolyticus）是一种嗜盐性细菌。副溶血性弧菌食物中毒是进食含有该菌的食物所致，主要来自海产品，如墨鱼、海鱼、海虾、海蟹、海蜇，以及盐分含量较高的腌制食品，如咸菜、腌肉等。该菌存活能力强，在抹布和砧板上能生存1个月以上，在海水中可存活47d。临床上以急性发病、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要症状。副溶血性弧菌食物中毒多在夏秋季节发生于沿海地区，常造成集体发病。该病多发生在6—10月海产品大量上市时。中毒食品主要是海产品，其次为咸菜、熟肉类、禽肉、禽蛋类，约有半数中毒者为食用了腌制品后中毒。中毒原因主要是烹调时未烧熟煮透或熟制品被污染。

1 病原学特征

副溶血性弧菌系弧菌科、弧菌属，革兰氏染色阴性，兼性厌氧菌，为多形态杆菌或稍弯曲弧菌，随培养基不同菌体形态差异较大，有卵圆形、棒状、球杆状、梨状、弧形等多种形态，两极浓染。菌体一端有单根鞭毛，运动活泼。无芽孢、无荚膜。该菌营养要求不高，在普通培养基中加入适量氯化钠即能生长。氯化钠最适浓度为35g/L，在无盐培养基中不生长。在液体培养基表面形成菌膜。在35g/L氯化钠琼脂平板上呈蔓延生长，菌落边缘不整齐，凸起、光滑湿润，不透明；在副溶血性弧菌专用选择培养基上形成1～2.5mm、稍隆起、浑浊、无黏性、绿色的菌落；在羊血琼脂平板上，形成2～3mm、圆形、隆起、湿润、灰白色的菌落，某些菌株可形成β溶血或α溶血；在TCBS琼脂上不发酵蔗糖，菌落绿色。

该菌不耐热，不耐冷，不耐酸，对常用消毒剂抵抗力弱。生长所需pH为7.0～9.5，最适pH为7.7。最适宜的温度为30～37℃，该菌对酸较敏感，当pH在6以下时不能生长，在普通食醋中1～3min即死亡。利用甘露醇产酸，可使甘露醇盐培养基变为黄色。该菌的致病性与其溶血程度是平行的。赖氨酸脱羧酶阳性，精氨酸双水解酶阴性。嗜钠离子，可在含7.5%氯化钠的培养基上生长。在3%～3.5%盐水中繁殖迅速，每8～9min为一个生长周期，在低于0.5%或高于8%盐水中停止生长。对热的抵抗力也较弱，50℃经20min、65℃经5min或80℃经1min即可被杀死。该菌对常用消毒剂抵抗力很弱，可被低浓度的酚和煤酚皂溶液杀灭。

该菌具有O、H及K抗原。O抗原分12个型，K抗原约有59个型。

2 致病性

该菌的致病株绝大多数能裂解人、兔等红细胞，因此可用溶血反应区分致病株与非致病株，此称为神奈川试验。该菌具有溶血性归因于其能产生溶血毒素，该毒素名为耐热直接溶血素（TDH），属于穿孔毒素，为不含糖或脂的蛋白质，相对分子质量32000～44000，与霍乱弧菌非O1群及拟态弧菌产生的TDH大致相同。TDH家兔肠袢结扎试验阳性，但致病性不如霍乱肠毒素及大肠杆菌肠毒素。另外，在神奈川试验阴性的菌株中，还发现一种不耐热的毒素磷酸酯酶A2，也被认为是该菌的毒力因子。

吞服10万个以上活菌即可发病，个别可呈败血症表现。该菌有侵袭作用，其产生的TDH和相对耐热直接溶血素（TRH）的抗原性和免疫性相似，皆有溶血活性和肠毒素作用，可引致肠袢肿胀、充血和肠液潴留，引起腹泻。TDH对心脏有特异毒性，可引起心房纤维性颤动、期前收缩或心肌损害。

3 流行病学特征

副溶血性弧菌的分布极广，副溶血性弧菌中毒发病期多在5—11月，以7—9月为高峰期。副溶血性弧菌中毒呈世界性分布，我国和日本发病率最高。由于气温能影响海产品及被污染食物的细菌繁殖，故在气温较高的沿海及海岛地区发病率较高，常呈暴发流行。各年龄均可发病，最幼为2个月大，最大的年龄为81岁，其中以青壮年居多。在我国近海的河中淡水鱼也有较高的带菌率。我国华东地区沿岸海水中的检出率为47.5%～66.5%，海产鱼虾的平均带菌率为45.6%～48.7%，夏季可高达90%以上。除了水产品以外，畜禽肉、咸菜、咸蛋等都被发现有副溶血性弧菌的存在。

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