细菌的分离培养（图）

一、目的与要求：

1.熟悉各种病料采集、处理方法。

2.掌握细菌分离培养方法。

二、原理：

分离培养就是把病料中的病原微生物或者把目的菌从混杂的微生物群体中分离培养出来，并获得分离物的单一生长材料。平板划线法是最常用的方法之一，通过沾有样本的接种环在平板上划线，将样本“稀释”，培养后使之形成单个菌落，从而达到分离的目的。

三、病原菌的分离培养达到如下要求：

1.要有严格的无菌操作概念，确保操作过程中实验对象不被污染，同时实验对象也不污染外界环境；

2.要重视病料采集的部位和时间，时间过长妨碍病原菌的检出；

3.选择合适的培养条件；

4.选择正确的分离方法，能否从病料和其它材料中成功获得病原微生物和目的菌，取决于分离技术。

四、材料：

试剂：普通培养基（牛肉粉蛋白胨培养基，上次试验配置）、待分离的菌种。

器材：接种环、酒精灯、火柴、恒温培养箱、超净工作台等。

五、步骤：

待检细菌材料细菌分离培养

（1）倒制平板

1）在火焰旁，用灼烧后的镊子打开培养基瓶塞，灼烧瓶口。

2）右手持培养基，左手拇指、食指及中指将培养皿在火焰附近打开一缝，迅速倒入培养基约15ml，厚度约为3-5mm，加盖后轻轻水平摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养基底部。

3）平置于桌面上，冷凝，勿动。

（2）平板划线分离

1）用记号笔在皿底外面中央划一直线，再在此线中间处划一垂直线。

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