(三)病毒鉴定: 经过采用红细胞吸附试验(HAD50)、免疫印迹试验(WB)、间接免疫荧光(IIF)及电镜观察等试验系统,均鉴定了这一分离病毒株。从此,成为自2018年8月3日首例非瘟疫情公布以来,完整披露非洲猪瘟病毒标志性的全面鉴定和确认,即在我国引起生猪广泛流行、急性发着、危害严重的出血性重症,是与波兰毒株(PoL/2017)基因II型的非洲猪瘟病毒高度相似的Pig/HLJ/18株。
图3、电镜下六角立体与直径的非瘟病毒 该成果对非瘟感染性、致病力和传播能力等生物学特性进行了较为系统的研究,并建立了动物感染模型;初步阐明了我国ASFV流行毒株的基因组特点和进化关系,为我国ASF疫情的有效防控提供了重要科学依据,为检测技术、疫苗免疫和中药防控的研发奠定了重要的物质基础。
图4、非瘟病毒复制原理与动物感染模型 (四)动物实验: 该实验室挑选了保育舍的7周龄SPF约克仔猪和长白仔猪,随机分为4组。为避开消化道及其消化酶的作用,全部通过肌肉内接种病毒。剂量为106.5HAD50,2头接种105.5HAD50;两组猪分别接种104.5HAD50和103.5 HAD 50。实验猪分别从感染第一天起与一头纯种猪共养,以评估ASFV接触传播。每天监测猪的体温和临床症状(厌食症、抑郁症、发烧、紫皮肤变色、步态惊人、腹泻和咳嗽)。每天采集血液、口腔和直肠拭子进行病毒检测。 |
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