2. 5 细菌分离培养 通过接种绵羊血平板和法国科玛嘉培养基,发现样本中仅有一种ß溶血革兰氏阳性球菌,溶血环直径可达2 mm(图7),且镜检形态与原始样本触片菌一致(图8)。
图7 ß样本溶血 图8 革兰氏阳性球型单菌镜检形态(oi1X 100) 2. 6 细菌16SrDNA PCR鉴定 收集纯菌落进行16SrDNA PCR检测,发现在1500 by处出现明亮条带;将测序结果在BLAST上进行同源性比较,发现与马链球菌马亚种和马链球马兽疫亚种同源性均达99%(图9)。
图9 16SrDNA PCR鉴定结果 2. 7生化鉴定 将生化指标(表2)与《伯杰氏手册》进行比对,发现该菌更符合马链球菌,而不是兽疫链球菌。经过触片镜检、菌株培养特点、16S测序、生化鉴定等试验,证明样本内的分离株为马链球菌马亚种。 |
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