西班牙专家：做到这些，就可以控制非洲猪瘟

“ASFv基因组成结构非常复杂，普通的病毒DNA只有10～20kb(即Kilobase, DNA长度单位，表示病毒某段DNA分子中含有1000个碱基对)，但ASFv的DNA有170～190kb。ASFv的DNA里面有腹膜细胞，使得耐受力很强，保护非常好，且它的变异性又很高，并不是单一的病毒，而是一个非常复杂的病毒家族。”桑切斯·斯凯诺分析说，“因此，研究ASF病毒家族，不能简单通过几个基因进行描述。换句话说，ASFv并不受某一抗体控制，如果只是采用单一抗体的药物，不能对它进行有效控制。另外，ASFv基因当中还有两个蛋白质非常复杂。”

“总体来说，如果仅从基因型来分析ASF病毒，是不管用的。”桑切斯·斯凯诺强调说，“对于ASFv来说，因为它的靶细胞是巨噬细胞和内皮细胞。巨噬细胞在机体整个免疫系统当中的作用非常重要，如果巨噬细胞受到了病毒侵蚀，机体免疫功能就会受到很大影响。另外，巨噬细胞在复制过程当中也会受到破坏。对于内皮细胞是另外一种情况，这就是为什么感染ASFv的猪会出现出血症状。”

桑切斯·斯凯诺介绍说，ASF临床表现主要有超急性、急性、亚急性，或者有时候没有任何明显症状，一旦出现不同问题需要采取不同的应对措施。在中国，大多数的ASFv感染病例属于急性-亚急性。通常，ASF急性-亚急性的症状主要包括：发烧、昏睡、厌食、皮肤出血以及循环系统、呼吸系统、消化系统出现问题并伴有神经失调，这些急性-亚急性的ASF临床症状与古典猪瘟（CSF）、猪丹毒症、沙门氏菌、放线杆菌、其他败血症、猪皮炎肾病综合征（PDNS）的临床症状非常类似，有时候容易混淆。因此，需要采集受感染猪只的样品进行实验室检测和诊断。比如，中国养猪规模如此大，很多时候ASFv携带了七八个月也没有暴发，甚至没有出血点，往往会被当成其他疾病。对应发烧、昏睡、厌食、皮肤出血这四个症状，如果发现猪只出现了其中3个症状，就要考虑它是不是感染ASFv，就需要取样进行实验室检测与诊断。有时候，可能过了几个月才在临床当中看到真正的ASF症状，这就是为什么它很难进行检测的原因。不仅仅是现场检测，包括和实验室合作取样，危险性高，因为操作不当ASFv可能传染给其他的猪。

“通常，急性ASF出现脾脏肿大的症状特别多，其次为淋巴系统病变。”桑切斯·斯凯诺说，在对2007年亚美尼亚感染ASFv的野猪进行病理检测发现，出现脾脏肿大的病例占比达到100%，同时还出现淋巴结肿大（94.12%）、出血性淋巴腺炎（88.23%）、胸膜积水（88.23%）、扁桃体出血（88.23%）、扁桃体化脓（52.94%）、肝肿大（88.23%）、休克肺（70.95%）、细支气管间质性肺炎(64.7%)、心包积水（70.59%）、心脏出血（47%）、肠道出血（76.47%）、派尔集合淋巴结坏死（35.29%）、肾脏出血（41.17%）等症状。他还强调称，对于野猪来讲，非常重要的一点，需要建立并完善早期检测体系，同时需要建立并完善应急计划。

桑切斯·斯凯诺认为，早期检测对于非洲猪瘟诊断非常重要。“这涉及早期检测率，虽然现在大部分实验室诊断非常好，但唯一的问题是在现场发现病猪之后，它的样品多长时间才能安全送到实验室。”他说，有时候，病毒血症会长时间存在，抗体也会存在好几年，所以需要进行长期的PCR（聚合酶链式反应）测试。

“抗体是ASFv的一个非常重要的感染标记物。在寻找抗原的时候，因为一些抗体与抗原会结合而成免疫复合物，尤其是直接用抗原剂诊断剂时，发现敏感度并不是那么高。所以，有时候需要用ELISA（酶联免疫吸附试验）或iELISA（间接酶联免疫吸附试验）对抗原进行检测。” 桑切斯·斯凯诺分析说，“如果PCR检测采用血清，敏感度并不那么高。但是，用全血更加敏感一些，因为有些病毒隐蔽性比较强。因此，做PCR检测一定要用全血。”

“对于ASFv检测样品组织而言，淋巴结很重要，还包括肺、肾、粪便以及脾虫，粪便里面有时也含血。ASFv检测中，很多时候主要看它的红血球吸附能力，还有红血球吸附为阴性的结果。但是，现在发现有些病毒不产生红血球吸附。因此，需要对它进行细胞病理效用的分析。” 桑切斯·斯凯诺说：“通常， PCR检测采用常规PCR或实时PCR。现在，更多采用第三种PCR方法——UPL-PCR（Universal Probe Library，UPL；UPL-PCR：实时定量探针库聚合酶链式反应）检测。从ASFv不同的检测结果来看，UPL-PCR最敏感。”

桑切斯·斯凯诺介绍说，在ASFv检测与诊断中，可以采用世界动物卫生组织的ELISA法来分析抗体，还可以通过实验室进行分析抗体。另外，还可以采用免疫印迹法来进行分析抗体，采用此法更容易识别出弱阳性样本。

“我这里还有很多ASF方面的数据和内容，我会发给主办方，大家可以参阅。”桑切斯·斯凯诺说，“我们还有ASFv检测笔，使用起来非常便捷，它在现场可以使用。我们还有视频，也有CD中文版，包括ASFv病原、流行病学、检测方法、诊断细节、疫苗开发等内容。”

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