摘要:为评估包虫病基因工程亚单位疫苗安全性和免疫效果,选取承德接坝地区4个牧场的479只8周龄羔羊进行免疫试验,免疫组羊分别于首次免疫前、加强免疫前及首次免疫后2个月、6个月和9个月采集动物血清,采用ELISA进行抗体检测。免疫疫苗后,个别羊有轻微的免疫反应;免疫组首次免疫前感染抗体阳性率为2.27%,加强免疫前抗体阳性率为87.16%,首次免疫后2个月、6个月和9个月的抗体阳性率分别为99.32%、93.49%和86.46%;对照组感染抗体阳性率为2.34%,试验开展9个月后的感染抗体阳性率为7.93%。结果表明,包虫病基因工程亚单位疫苗能够快速诱导机体产生抗体,并且抗体维持期较长,9个月后动物个体仍维持较高的抗体水平。因此,该亚单位疫苗免疫效果及安全性较好,可以在包虫病流行区推广应用。 关键词:包虫病;棘球蚴;疫苗;基因工程;亚单位;免疫试验 包虫病又名棘球蚴病,是棘球绦虫的中绦期,寄生于羊、牛等家畜及多种野生动物和人的肝、肺及其他器官内引起的人兽共患寄生虫病,为我国优先防治的二类动物疫病。河北省承德接坝地区特殊的饲养管理方式及气候条件为该病的流行提供了有利条件。包虫病危害严重、防治困难。保护易感动物,对中间宿主进行免疫,控制包虫病感染率,是防治包虫病的重要措施[1]。为了评估包虫病基因工程亚单位疫苗在该地区应用的安全性和免疫效果,进行本试验。 1 材料与方法 1.1 试验对象 选择接坝地区4个牧场(编号为A、B、C、D)8周龄左右羔羊共479只,牧场饲养方式为自然放牧。 1.2 试验分组 将每场的动物进行随机分组,免疫组308只、对照组171只(表1),免疫组除注射疫苗外,其他条件与对照组完全一致。 表1 各牧场试验动物分组情况 单位:只
1.3 试验疫苗 羊棘球蚴(包虫)病基因工程亚单位疫苗(主要成分:羊棘球蚴EG95抗原),由重庆澳龙生物制品有限公司生产,批号:2017013-1,生产日期:20171114,有效期1年。 1.4 免疫程序与方法 8周龄左右进行首次免疫,首次免疫后间隔1个月加免1次。按照疫苗瓶签注明的头份,用疫苗专用稀释液稀释,羊颈部皮下注射1ml/只。 1.5 安全性评价 免疫后对免疫动物的精神状态及注射部位局部变化等进行仔细观察,持续2天,确定有无疫苗反应及疫苗反应的轻重程度。 1.6 抗体检测 免疫组分别于首次免疫前、加强免疫前、首次免疫后2、6和9个月,对全部免疫组羊采血收集血清,对照组羊于试验前和试验开展9个月后分别采血收集血清,用羊棘球蚴(包虫)病ELISA抗体检测试剂盒(批号:20180110)进行检测,按照试剂盒说明书进行操作及阴阳性判定。 2 结果 2.1 疫苗安全性 试验组羊有个别羊有轻微的疫苗反应,表现为精神萎顿,饮食欲减退,注射部位轻微肿胀,但很快恢复。 2.2 免疫效果检测 免疫组:首次免疫前感染抗体阳性率为2.27%;1个月后(加强免疫前)平均抗体阳性率上升到87.16%;首次免疫后2个月、6个月和9个月的抗体阳性率分别为99.32%、93.49%和86.46%。 对照组:首次免疫前感染抗体阳性率为2.34%, 9个月后,抗体阳性率为7.93%(表2)。4个牧场免疫效果检测具体结果见表3。 |