3.5 制定 SVV 诊断国家标准,同时开发快速、灵敏、方便的现场诊断方法及高通量鉴别诊断方法 目前,在实验室病原学检测方面,国内外多家研究机构针对SVV基因3D、5´UTR和VP1等保守区域建立了普通RT-PCR、荧光定量RT-PCR和原位杂交ISH-RNA方法。中国动物卫生与流行病学中心外来病研究中心利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA)建立了实时荧光检测方法,在40 ℃、10 min内可检测的核酸最低浓度为28 拷贝/µL[26]。在血清学检测方面,通过表达SVV VP1重组蛋白或利用二乙烯酰胺(BEI)灭活SVV免疫小鼠制备抗SVV单抗[28],分别建立了间接和竞争ELISA等方法。加拿大Bio-vet公司已开发了商品化的SVV抗体cELISA诊断试剂盒。除了ELISA方法外,间接免疫荧光试验与病毒中和试验检测方法也用于流行病学监测及调查。针对目前SVV流行情况,应尽快制定SVV国家诊断标准,此外可利用RPA恒温扩增技术和胶体金等技术,开发适于基层兽医和猪场使用的病原和抗体快速检测试纸条;利用液相芯片和α-ELISA等技术,开发高通量多重检测方法,对可导致猪出现水疱性临床症状的FMDV、SVV、SVDV、VSV和VESV等病原做出病原学和血清学鉴别诊断。 3.6 研制新型安全有效的 SVV 疫苗 目前尚无商品化的 SVV 疫苗问世。美国以当地SVV流行株KS15-01为骨架,利用反向遗传技术,构建了感染性克隆 vKS15-01-EGFP,为下一步通过定点突变,研发高效、无致病性且具备标记(DIVA,区分感染和免疫动物)的重组病毒活疫苗提供了依据。此外,可将口蹄疫合成肽疫苗作为参照,利用计算机辅助进行抗原位点分析预测,对主要抗原位点进行变异情况研究,对可能的抗原位点肽段进行化学合成,通过动物试验对候选 SVV 多肽抗原进行筛选,根据筛选结果对抗原位点进行优化,确保有效囊括 T 细胞表位和 B 细胞表位,以增强多肽抗原的免疫效果。 3.7 加强饲养管理,提高生物安全水平 由于目前没有疫苗或有效的治疗方法来防治SVV,因此猪场的饲养管理和生物安全防范至关重要。哺乳母猪和仔猪的圈舍环境应舒适,并确保 1周龄内仔猪摄取足量优质初乳。猪舍应远离公路等车辆流通区域,最好做到运输生猪车辆专车专用,出入场舍做好消毒,且应避免该车与 SVV 阳性猪场车辆、人员和动物接触。饲养人员进出猪舍应沐浴并更换工作服和靴子,接触不同猪群时应有间隔观察期。应从猪群健康、无疫病发生的猪场引种,有条件的可在引种前对待引猪进行抽样检测,混群前隔离观察。避免老鼠、苍蝇等生物媒介与猪群接触。对于 SVV 阳性猪场,除了提高管理水平外,应严格执行全进全出制度,对猪舍、设备和工具严格清洁和消毒。 4 小结 猪 SVV 作为近两年在全球多地出现的一种跨境动物疫病病毒,已对多国养猪业造成了不同程度的影响,但其受到的关注还远远不够。SVV 的致病机制和传播方式如何,未来流行态势将怎样演变,不得而知,但可以明确的是各国应对 SVV 高度重视。我国是养猪大国,生猪养殖总量约为全球的50%,是最大的生猪生产基地和猪肉需求市场。根据 2017年2月28日国家统计局发布的《2016 年国民经济和社会发展统计公报》数据显示,2016 年末我国生猪存栏43 504万头,生猪出栏68 502万头,生猪养殖业在国计民生中占有重要地位。因此,有必要提高认识,紧密把握 SVV 的流行态势,研究病毒宿主相互作用机制,尽快做好诊断和疫苗技术储备,提高对 SVV 的综合防控能力。 |
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