兽医图谱

副猪嗜血杆菌与猪链球菌混合感染案例分析(图)

日期:08-06 作者:郭春和、朱振邦等- 小 + 大

1、发病情况及临床症状

江西某猪场仔猪陆续出现行动困难、跛行、蹄不着地等症状,仔猪四肢关节出现不同程度的肿大,触诊有波动感,有的猪的关节按压时有摩擦感,用力按压猪有疼痛感。剖检发现心包有积液,肺脏有部分淤血。划开后肢关节有大量的黄色脓性渗出物,关节腔内有黄色积液,关节囊、滑膜严重增生,关节腔内出血充血严重,且有炎性增生(图1)。


图1 送检仔猪的临床症状及病理变化。(A)仔猪后肢关节肿胀(B)划开关节皮肤,有大量化脓性渗出物
(C)关节腔内有黄色积液,关节囊、滑膜严重增生,关节腔内出血充血严重,且有炎性增生。


2、实验室诊断

2.1 材料

2.1.1 血样采集

对2头发病仔猪进行前腔静脉采血5 mL,析出血清,用于血清学诊断

2.1.2 仔猪剖检

对2头发病仔猪进行病理剖检,分别剪取出肺脏、腹股沟淋巴结、脾脏等病变组织并收集心包液、关节液及关节脓性渗出物,用于细菌的分离培养和PCR鉴定

2.1.3 培养基及试剂

大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA,广东环凯微生物科技有限公司)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)、胎牛血清、血平板、革兰氏染色液、2×Taq PCR StarMix with Loading Dye(GenStar)、病毒DNA/RNA提取试剂盒(Magen)、RT-PCR试剂(Takara)

2.1.4 药敏试验材料

环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、卡那霉素、替米考星、磺胺甲恶唑、大观霉素、氨苄西林链霉素、新霉素、庆大霉素、阿莫西林、氟苯尼考、头孢曲松、头孢拉定、万古霉素、四环素共17种药敏试纸均购于OXOID公司

2.2 方法

2.2.1 PCR鉴定

2.2.1.1 引物合成

参考NCBI上猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪链球菌、副猪嗜血杆菌特异蛋白的基因序列,用Primer 5.0 软件分别设计了它们具有高特异性和敏感性的引物,对分离到的疑似猪蓝耳病毒、链球菌和副猪嗜血杆菌进行PCR鉴定,引物序列及扩增片段长度,由苏州泓迅生物科技有限公司合成(表1)。

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