非洲猪瘟的研究进展

有研究者采用巢氏PCR诊断方法，分别设计多对引物，由扩增出的大片段序列为模板，再利用引物进一步扩增其中的部分靶序列片段。由于多套引物都互补的靶位序列很少，降低了扩增多个靶位点的可能性，增加有限量靶序列的灵敏性和特异性。其对60份PCR检测呈阴性的疑似病例进行巢式PCR试验，其中16份呈阳性结果，显示出此方法的可靠和准确性。

有研究者采用荧光定量PCR技术检测非洲猪瘟病例，对亚临床症状的病例进行诊断，采用荧光PCR的方法，以病毒的结构蛋白p72为靶序列，利用电脑分析PCR过程产生的荧光信号，耗时可控制在2 h以内，克服了常规PCR技术易污染的缺点，更加快速、灵敏。

运用多重PCR分析法可以同时检测猪瘟、非洲猪瘟、猪细小病毒、猪圆环病毒（PCV2）、猪繁殖及呼吸障碍综合征5种病毒性传染病。与单一病毒的PCR诊断相比，实验开发了极具应用价值的高效的分子诊断方法。

根据ASFV的P72基因的核苷酸序列，有研究人员设计并合成引物以及荧光标记的TaqMan 探针，以含P72基因的重组质粒作为阳性模板，建立常规PCR和Rea1-time PCR方法，结果为常规PCR的检测灵敏度是600个拷贝的病毒核酸分子。Rea1-time PCR的检测灵敏度是20个拷贝的病毒核酸分子，建立的常规PCR和Rea1-time PCR方法均只需要2 h左右，检测结果的特异性和敏感性都很高，适合大批量检测。

五、防制策略及发展趋势
　　迄今为止，尚未发现有效的治疗药物，也无有效的疫苗用于预防。灭活疫苗效果不明显，而弱毒疫苗安全性差，易导致慢性流行。对ASF的流行，几乎都采取封锁、扑杀和销毁的措施。无ASF流行的国家和地区，通常采用综合防制措施防止病毒传入，包括禁止从ASF国家进口活猪及其产品，对来自ASF流行国家的车船、飞机作无害化处理，严格封存其食品仓中的猪肉制品等，建立快速诊断方法和制定一旦发生本病时的扑灭计划。目前世界上一些国家已经制定了对ASF等重大传染疫病的综合检测方法，如实时荧光PCR和ELISA两种方法结合检测，分别在DNA和蛋白质水平上进行判断。作为养猪业大国，中国必须制定出严密、高效的防制系统，包括快速、准确的检测诊断系统，高效的预警机制等，来避免ASF等重大疫病的传入，提高对疫病的监测和紧急防制能力。

参考文献（略）