兽医战略

动物布鲁菌病的流行态势与防控策略

日期：09-21 作者：阳光畜牧网- 小 + 大

    ５　诊断
    本病的临床症状、剖检变化常缺乏明显特征，确诊需进行实验室检验。常用的实验室检验方法为细菌学、分子生物学和血清学。
    ５．１　细菌学　传统的病原学诊断方法为细菌分离与鉴定。采取流产胎儿、胎盘、阴道分泌物或母畜子宫绒毛膜，抹片，革兰或姬姆萨染色后显微镜观察，阳性病例可见大量革兰阴性或姬姆萨染色呈紫色的球杆状短小杆菌。分离布鲁菌的成功率很大程度上取决于分离的方法，同样细菌分离与取材、血清学反应有密切关系，同时存在地区分布。
    ５．２　分子生物学　近年来，快速、特异、灵敏的ＰＣＲ检测方法应用到布鲁菌病诊断中。Ｂｒｉｃｋｅｒ等针对牛、羊、猪种布鲁菌存在种间反复差异的ＩＳ７１１保守基因单元，设计不同的引物，利用ＰＣＲ技术成功区别鉴定布鲁菌的各个种［８］，区分人工免疫Ｓ１９或ＲＢ５１与自然感染动物，但鉴定疫苗种类限为Ｓ１９或ＲＢ５１［８］。Ｄｏｒｓｈ等（１９８９）发表了牛布鲁菌病１６ＳｒＲＮＡ基因序列，该基因也可作为布鲁菌病鉴定的特异性基因［９］，２００１年，Ｃｌｏｅｃｋａｅｒｔ等又发现，利用ｏｍｐ２基因的多态性也可以将海洋种与其他布鲁菌区分开［１０］，Ｗｈａｔｍｏｒｅ等利用ＰＣＲ扩增产物长度多态性可以将布鲁菌牛种、羊种、沙林鼠种、犬种、猪种、绵羊附睾种，以及海洋布鲁菌区别开来［１１］。随着分子生物学的发展，布鲁菌基因组测序的完成，越来越多的布鲁菌基因得以应用到鉴定诊断工作中。
    ５．３　血清学　国内常用的血清诊断方法有多种，其中：虎红平板凝集试验（ＲＢＰＴ）、缓冲平板试验（ＰＴ）主要用于筛选试验；确诊需要进行试管凝集试验（ＳＡＴ）和补体结合试验（ＣＦＴ）；常用于奶牛布鲁菌病检测是乳环试验（ＭＲＴ）。

表１　常用的血清学试验特点与适用对象

试验名称	特点	适用对象
虎红平板凝集试验（ＲＢＰＴ）	敏感性高，特异性相对差些	筛选
试管凝集试验（ＳＡＴ）	敏感性、特异性却不是很好	官方确定其定位
补体结合试验（ＣＦＴ）	特异性好，敏感性较差，是个体诊断的“金标准”	官方普遍用于个体判定（猪除外），对群体不宜
乳环试验（ＭＲＴ）	ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ参与反应，与凝集试验和ＣＦＴ相比检出率略低，与ＳＡＴ结果不完全一致	特别用于检查泌乳期的牛，也用于泌乳期的绵羊，山羊等
酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）	操作方便，对于疾病诊断具有很高的敏感性	作为确定检测、也可筛选和鉴别用；不仅用于血清学诊断，还用于乳汁检查
水解素变态反应	诊断人、畜布鲁菌病是一项行之有效的方法，特异、敏感且简便易行	用于布鲁菌病特异性诊断，流行病学调查及菌苗接种的免疫反应的观察；以羊诊断多见，作为补充试验，有时作为犬的布鲁菌病实验室检验
胶体金免疫层析检测技术（ＧＩＣＡ）	诊断牛布鲁菌病，表明不仅试剂敏感、特异且血清用量少，操作简便	适用于布鲁菌病诊断、流行病学调查及现场检测

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