动物结核病诊断技术标准 GB/T18645—2002 1 范围 本标准规定了动物结核病的检测方法和要求。 本标准适用于动物结核病检测。 2 定义、符号和缩略语 本标准采用下列符号和缩略语: PPD:提纯蛋白衍生物(purifiedproteinderivative)。 IU:国际单位(intemationalunit)。 3 细菌学检查 3.1病料的采集和处理 用于细菌学检查的材料采自淋巴结及其他组织。当活畜有可疑的呼吸道结核、乳房结核、泌尿生殖道结核、肠结核时,其痰、乳、精液、子宫分泌物、尿和粪便可作为细菌学检查的材料。 对那些结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验阳性,但尸检时无病理学病变的动物,可从下颌、咽后、支气管、肺(特别是肺门及肺门淋巴结)、纵膈及一些肠系膜的淋巴结采集样品送检。 样品应封装在无菌的容器内冷藏运送。 为了提高检出结果,样品可采取消化浓缩法处理,处理方法见附录A(标准的附录)。 3.1.1痰 对牛常可用痰进行细菌学检验。牛咯痰极少,它在清晨采集。用硬橡胶管自口腔伸入至气管内。外端连接注射器吸取痰液。亦可取牛咳出的痰块进行检验。 痰样品稀薄时,可加入等量的4%~6%硫酸(见附录A中A1)处理,如痰样品粘稠时,则加入5倍量的4%硫酸处理。充分摇匀后置37℃作用20min,以3000r/min~4000r/min离心,沉淀物作染色镜检、培养和动物试验。 也可用2倍量15%~20%安替福民(antiformin)溶液(见附录A中A3)处理痰液,将混合物置37℃作用lh—2h后离心。以灭苗生理盐水冲洗沉淀物几次后,取沉淀物染色镜检、培养和动物试验。 3.1.2乳 怀疑有乳房结核时,可无菌采集乳汁进行检验(一般以挤出之最后乳汁含菌量较多,早晨挤出的乳中含菌量最高)。 将乳汁分置4~6支离心管中,每管l0mL,以3000r/min~4000r/min离心20min~30min,吸取上层乳脂和管底的沉淀物作染色镜检、培养和动物试验。 乳汁lOmL加酒精和乙醚各l0mL及15%~20%安替福民溶液30mL,摇匀置37℃恒温箱内lh~2h,取出加等量灭菌蒸馏水混匀,离心沉淀后弃去上清,取沉淀物作染色镜检、培养和动物试验。 3.1.3精液和子宫分泌物 有生殖道结核可疑时,可采集公畜精液、母畜子宫分泌物进行细菌学检查。 处理子宫分泌物,可用15%~20%安替福民溶液,混匀后静置2h~3h,3000r/min~4000r/min离心20min,弃上清,加l0mL蒸馏水于沉淀物中。即可作动物试验,经1.5~2个月剖检。 3.1.4尿 有肾结核可疑时,可采集尿液,一般采集中段尿液,以早晨第一次尿为宜。 如仅作染色镜检,可将尿液以3000r/min~4000r/min离心20rain后,取沉淀物涂片。 如作培养或动物试验,则应将尿液进行消化浓缩处理,再进行检验以免杂菌生长而影响检验结果。 |
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