规范标准
重庆市动物疫病病原监测技术规范
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4 监测样品的采集 4.1样品采集器材 4.1.1血清、全血采集器材 5mL、10mL一次性注射器、15mL离心管、1.5mLEP管、抗凝剂（0.1%肝素、阿氏液、枸橼酸钠）或装有玻璃珠的灭菌瓶、记号笔、防护服、无粉乳胶手套、防护口罩、签字笔、铅笔、空白标签纸、胶布、75%酒精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒药品、组织采样单等。 4.1.2 组织样品采集器材 准备灭菌的解剖器械（剪刀、镊子、手术刀、大刀、斧头等）、灭菌试管、平皿或自封袋、载玻片、棉签、营养肉汤、30%、50%甘油盐水缓冲液、加抗生素的PBS（病毒保存夜）、50％甘油磷酸盐缓冲液、酒精灯、灭菌注射器、15mL的离心管、1.5mLEP管、记号笔、签字笔、防护服、无粉乳胶手套、防护口罩、铅笔、空白标签纸、胶布、75%酒精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒药品、组织采样单等。 4.2 活畜样品的采集 4.2.1 血清样品的采集 血清样品采集详见《重庆市动物疫病免疫抗体监测技术规范》。 4.2.2 全血样品的采集 全血采集后应直接注入盛有抗凝剂的试管中，立即摇动，充分混合。也可将全血液注入盛有玻璃珠的灭菌瓶中，立即连续振荡脱纤维蛋白。 4.3 活禽样品的采集 咽喉拭子的采集：将棉签插入喉头口及上颚裂处来回刮3～5次取咽喉分泌液，泄殖腔拭子的采集：将棉签插入泄殖腔转2～3圈并沾取少量粪便，再将咽喉拭子、泄殖腔拭子一并放入盛有0.8～1.0mL加有抗生素PBS的EP管中，加盖，编号。 4.4 病死（屠宰）畜禽样品的采集 4.4.1 解剖前检查 急性死亡的牛、羊、猪、马等动物，解剖之前应作临床检查，疑似炭疽病的应采血、镜检，排除炭疽病时，方可解剖。动物死亡后应在6h内进行剖检。解剖人员要做好自我防护工作。 4.4.2 肝、脾、肾、淋巴结、肺和牛、马心脏样品的采集 在肝、脾、肾、淋巴结、肺和牛、马心脏有病变的部位各采取2～3cm3的小方块，分别置于灭菌的试管或平皿中。其他畜禽采集整个心脏，置于自封袋中。细菌分离样品的采集可用烧红的刀片烫烙脏器表面，在烧烙部位刺一孔，用灭菌后的铂金耳伸入孔内，取少量组织或液体，作涂片镜检或划线接种于适宜的培养基上。 4.4.3 脑、脊髓样品的采集 取脑、脊髓2～3cm3浸入50%甘油盐水中或将整个头部（猪、牛、马除外）割下，用消毒纱布包裹，置于不漏水的容器中。 4.4.4 肠、肠内容物及粪便样品的采集 肠样品的采集：选择病变最严重的部分，将其中的内容物弃去，用灭菌的生理盐水轻轻冲洗后，置于试管中。肠内容物样品的采集：烧烙肠壁表面，用吸管扎穿肠壁，从肠腔内吸取肠内容物，放入盛有30%甘油盐水中或者直接将带有粪便的肠管两端结扎，从两端剪断。粪便样品的采集：用棉签插到直肠黏膜表面采集粪便，然后将拭子放入盛有30%甘油盐水中。 4.4.5液体病料样品的采集 采集胆汁、脓、粘液、关节液、水泡液等样品时，用药物或烫烙法消毒采样部位，用灭菌吸管（毛细吸管、注射器）经消毒部位插入，吸取内部液体，然后将病料注入灭菌试管中，加盖。也可用接种环经消毒部位插入，提取病料直接接种在培养基上。 4.4.6 胎儿样品的采集 取流产后的整个胎儿，装入自封袋或不透水塑料薄膜中。 4.4.7 皮肤样品的采集 用清水清洗病变皮肤后，取病变皮肤3～5g放入灭菌小瓶中,加适量50％甘油磷酸盐缓冲液(pH7.4),加盖密封。 |
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