规范标准
牛冷冻精液国家标准
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本标准适用于奶牛、兼用牛、肉牛和黄牛的冷冻精液产品。 1、规格与质量 1.1 剂型 细管、颗粒和安瓿 1.2 剂量 a.细管：中型0.5mL；微型0.25mL。 b.颗粒0.1mL土0.01mL。 c.安瓿0.5mL。 1.3 精子活力 解冻后的活力，指呈直线前进运动的精子百分率(下限)30％(即0.3)；精子复苏率(下限)50％。 1.4 每一剂量解冻后呈直线前进运动的精子数。 细管：每支(下限)1000万个。 颗粒：每粒(下限)l200万个。 安瓿：每支(下限)1500万个。 1.5 解冻后的精子畸形率(上限)20％； 1.6 解冻后的精子顶体完整率（下限）40％ 1.7 解冻后的精液无病原性微生物，每毫升中细菌菌落数(上限)1000个。 1.8 解冻后的精子存活时间。 在5—8℃贮存时(下限)为12h；在37℃贮存时(下限)4h。 牛冷冻精液(以下简称“冻精”)，必须符合上述各项指标。否则，不得使用。 2、制作程序 2.1 采精 2.1.1 种公牛的质量 用子制作冻精的种公牛，其体型外貌和生产性能，均应合乎本品种的种用公牛特等、一等标准。在目前尚未建立国营种畜后裔测定站的地区，主力公牛必须经过种畜繁育场，进行后裔测定。由省、市、自治区级畜牧科研部门把关，未经后裔测定的种公牛的冻精， 必须经上级主管部门审批，严格控制使用。 2.1.2 种公牛的体质 种公牛必须体质健壮，新引进的公牛，应在隔离场所经过检疫。种公牛须经正式兽医机构和兽医师证明，无下列传染病者，如牛肺疫、布鲁氏杆菌病、牛结核病、牛副结核病、牛白血病、钩端螺旋体病、传染性鼻气管炎、病毒性腹泻病、胎儿弧菌和阴道滴虫症等，才允许使用。 上述各种疫病的检查方法，可按中华人民共和国农牧渔业部颁布的有关规定执行。 2.1.3 成年种公牛每周采精两次；每次也可根据具体情况和需要，连续排精两回。采精前，应先用温水洗公牛阴茎和包皮，然后再用灭菌生理盐水冲洗干净。 2.1.4 种公牛的新鲜精液，应符合下列质量标准。不具备其中任何一项者，不得用子制作冻精； a. 新鲜精液的色泽应呈乳白稍带黄色。 b.直线前进运动精子(下限)60％。 c. 精子密度每毫升(下限)6.0亿。 d.精子畸形率(上限)15％。 2.2精液的稀释 2.2.1 稀释保护剂的配制。 2.2.1.1 配制冻精用的稀释保护剂，必须用新鲜的双重蒸馏水和卵黄，二级品以上的化学试剂。 2.2.1.2 所用器具，必须达到牛冷冻精液人工授精技术操作规程的标准，保证清洁、无菌。 2.2.1.3 推荐下列配方，作为冻精用稀释保护剂。 a.细管用： 第一液 蒸馏水100mL，柠檬酸钠2.978，卵黄10mL。 第二液 取第一液41.75mL，加入果糖2.5ｇ，甘油7mL。 脱脂奶82mL，卵黄10mL，甘油8mL。 b.颗粒用： 12％蔗糖液75mL，卵黄20mL，甘油5mL。 2.9％柠檬酸钠液73mL，卵黄20 mL，甘油7mL。 c.安瓿用： 可参照以上各种配方酌情使用。 上述各类稀释保护剂，在每100mL中，应加青霉素、链霉素各5万—10万单位。 稀释保护剂要现配现用；亦可配后放入4—5℃冰箱中备用，但不应超过1周。 2.2.2 稀释比例 不做具体规定，但必须保证每一剂量(细管、颗粒、安瓿)中，解冻后所含直线前进运动精子数的规定。 2.3 降温和平衡(预冷) 稀释后的精液，采用逐渐降温法。在1—1.5h内，使稀释精液的温度降到4—5℃；然后再在同温的恒温容器内平衡2—4h。 |
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