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单克隆抗体在治疗犬细小病毒病中的临床应用
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犬细小病毒病是由犬细小病毒(CPV)感染幼犬引起的一种急性传染病，以剧烈的呕吐、出血性肠炎和白细胞显著减少以及心肌炎为主要特征，发病率高，传染性强，死亡率高，是危害我国养犬业最为严重的传染病之一。我国于1982年证实此病后，并已分离到多株病毒。由于目前小动物临床没有特效的抗病毒药物，单一的对症治疗，往往很难奏效。犬细小病毒单克隆抗体能特异性的中和病毒，减少体内病毒数量和病毒对机体组织的破坏，增强机体的免疫能力，大大提高犬细小病毒病的治愈率。 一、病原学 犬细小病毒为无囊膜，单负股的DNA病毒，由3个结构蛋白VP1、VP2和VP3组成。其中VP2是其保护性颗粒抗原。该病毒有2种不同的型，即CPV-1型和CPV-2型。CPV-1型，又称犬微小病毒(MVC)，可引起幼犬肺炎、心肌炎和肠炎，或经胎盘感染引起胚胎吸收和胎儿死亡，但MVC仅引起40日龄以下的幼犬出现临床症状。CPV-2作为犬的一个新型病毒与猫泛白细胞减少症病毒(FPV)很相近。原有的CPV-2仅仅引起犬全身和肠道感染，不能引起猫的自然感染。由于CPV-2经历了变异并产生了新的毒株，在原有的基础上出现了CPV-2a型和CPV-2b型。而新的CPV-2a和CPV-2b型病毒株可引起猫在试验和自然条件下感染，并可在犬和猫之间传播。我国目前以CPV-2b型为主。 二、流行病学 犬细小病毒对犬具有高度的接触性传染性，各种年龄的犬均可感染。但以刚断乳至90日龄的犬发病较多，病情也较严重。幼犬有的可呈现心肌炎症状而突然死亡。据临床发病犬的种类来看，纯种犬及外来犬比土种犬发病率高。本病一年四季均可发生，但以天气寒冷的冬春季多发。病犬的粪便中含毒量最高。 三、发病机理 病毒侵入后在感染的头两天，口咽部复制，通过血流传播到其他器官，3～5 d后出现病毒血症。虽然通常肠炎病症明显，但犬细小病毒感染是全身性的。病毒通过血流而不是肠腔到达肠黏膜。病毒主要攻击2种细胞：肠上皮细胞和心肌细胞。在犬间，CPV-2经口鼻迅速传播，病毒开始在咽喉部淋巴组织、肠系膜淋巴结和胸腺内复制，而后传播到小肠的肠隐窝。CPV-2感染肠隐窝胚上皮组织，引起上皮组织破坏和萎陷，导致正常的细胞更新被损害，肠绒毛变短。病犬肠道各段黏膜上皮细胞均坏死、脱落，固有膜暴露，肠腺上皮细胞也有程度不同的坏死、脱落。心肌细胞变细、变长，局部断裂、崩解，间质水肿，心肌毛细血管扩张、充血。脾脏和淋巴结中淋巴细胞数量减少。其他各器官都有不同程度的充血、出血以及炎性细胞侵润。在严重感染的情况下，常常出现中性粒细胞减少症和淋巴细胞减少症。 四、临床症状 犬细小病毒感染犬后，在临床上可分为肠炎型和心肌炎型。肠炎型：自然感染的潜伏期为7～14 d，病初表现发热（40℃以上）、精神沉郁、不食、呕吐。初期呕吐物为食物，随之粘液状、黄绿色或有血液。发病一天左右开始腹泻。病初粪便呈稀状，随病情发展，粪便呈咖啡色或番茄酱色样的血便。以后次数增加、里急后重，血便带有特殊的腥臭气味。血便数小时后病犬表现严重脱水症状，眼球下陷、鼻境干燥、皮肤弹力高度下降、体重明显减轻。对于肠道出血严重的病例，由于肠内容物腐败可造成内毒素中毒和弥散性血管内凝血，使机体休克、昏迷死亡。血相变化，病犬的白细胞数可少至60％～90％（由正常犬的1.2 万/μ l减至4 000个以下）。心肌炎型：多见于40日龄左右的犬，病犬先兆性症状不明显。有的突然呼吸困难，心力衰弱，短时间内死亡；有的犬可见有轻度腹泻后而死亡。 五、犬细小病毒单克隆抗体在治疗犬细小病毒病中的应用 （一）犬细小病毒单克隆抗体的制备 犬细小病毒单克隆抗体(CPV McAb)是利用细胞融合技术，将犬细小病毒免疫的BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0瘤细胞融合，制备出能分泌抗犬细小病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株，从中培养筛选出特异性的杂交瘤细胞，接种生物反应器进行连续罐流培养，经浓缩纯化后制备的高效特异性抗体，即为治疗和预防犬细小病毒的单克隆抗体制剂。与高免血清相比，单克隆抗体具有质地均一，纯度高，特异性强，效价高，又能大量、快速、连续和无限地生产等优点。 |
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