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非洲猪瘟荧光定量PCR检测常见假阳性结果分析

时间:2020-11-06    点击: 次    来源:抗非大家谈    作者:赵和平 - 小 + 大

图1 PCR实验室平面布局示意图
注:四个独立工作区,从试剂配制区到产物分析区空气压力逐步降低;试剂配制区和样本处理区是正压室,外开门设计,保证外面的空气不进入;核酸扩增区和产物分析区是负压室,内开门设计,防止里面的空气溢出。
目前很多集团公司中心实验室装修设计越来越规范,但是区域实验室和临床实验室大多条件相对简陋,很难达到标准实验室要求。建议基层实验室在布局时,尽可能分三个房间设置不同功能区,如果做不到空气净化和压差控制,则每个房间应安装排气扇,及时通风。
专家王长年点评:
非洲猪瘟背景下,猪场的生物安全风险(包括猪场人员流动、物品流动和猪只流动等)的监测评估、精准清除、引种(包括引入种猪和/或引入公猪精液等)都离不开实验室的检测,尤其是PCR实验室的检测。精准检测也逐渐成为各养猪企业的核心竞争力之一。
PCR实验室在检测非洲猪瘟病毒核酸的过程中常见一些假阳性结果, 而这些错误的信息又会给猪场相关管理人员带来极大的心理和工作压力。本文作者就非洲猪瘟PCR检测过程中经常出现的假阳性结果的主因(如样本的采集、运输、保存和处理、阳性对照、试剂盒生产厂家、与之配套的仪器设备等)进行分析,对如何减少和避免假阳性结果发生(如人员培训、仪器配套、内参设置等)以及在实验室建设方面进行科学、合理、规范化的设计(如分区设置、通风处理)等多方面内容进行介绍,非常适合广大基层PCR实验室作为参考。

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