冷冻保存对猪精液品质的影响

4.5 调节降温程序

精液采集前，需要将采精杯、滤纸保鲜袋等置于恒温箱中预热至37 ℃，精液收集后立即送往实验室，取一滴精液于显微镜下观察，确定精子活力正常且无畸形等异常情况，再进行降温处理。使用毛巾包裹收集瓶室温静置1 h，使其缓慢下降至17 ℃，有助于降低抗低温打击，该过程结束后进入离心浓缩稀释程序，添加17 ℃蛋黄冷冻稀释液，17 ℃条件下800 g离心10～25 min，离心前，可在离心瓶瓶底加入1～2 mL离心垫，防止精子沉淀以及紧贴底部导致精子损伤。之后采用水浴降温至15 ℃，再缓慢降温至4 ℃，人工操作可能使温度保持不均衡，建议使用降温平衡柜来达到精准控制降温速率。4 ℃降温程序结束，可进行冷冻降温环节，精液添加稀释剂后，可在4 ℃条件下进行灌装，提前打开冷冻仪并执行程序，完成灌装后记录冷冻料架，迅速转移至冷冻仪中降温。

5  小结

影响公猪精子的因素有很多，严格控制采精场地的卫生、消毒程序，可以减少精液中细菌含量。自动采精系统相较于传统人工采精，精液中细菌含量可以最大程度得到控制。季节、个体健康以及公猪年龄等因素，会影响精液品质。精液采集时选取第二段富含精子的精液，并对精子健康状况与活力进行检查，避免出现劣质、死亡、凋亡的精子，之后进行精子耐冻性试验，只有符合条件的精子才能进行冷冻保存。冷冻保存技术的发展，可以对优秀的种猪资源进行利用，同时，冷冻保存可以克服距离的问题，实现了种猪资源的交流，减少了养殖户运输成本的同时又极大丰富了猪只的类型。现阶段，猪精液冷冻保存技术虽在逐步发展，冷冻之后的精子质量、活性以及受精率等问题，还需要在之后的研究与实践中实现进一步的发展。

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