猪蓝耳控制和净化工具

三、蓝耳控制和净化工具包

监测工具

通过检测来制定成功的蓝耳净化

已经证明可以从一个猪群里面清除蓝耳病毒。但是，一个区域如果没有准确定义那么就不知道到底有没有成功净化蓝耳病毒。猪群比较低的蓝耳病毒流行率使得准确检测和确定蓝耳状态阴性比较困难（Morrison,2009）。

1.检测：

1.1 ELISA

之前的研究表明在一个绝对阴性的群体，蓝耳ELISA的敏感为96.6%，特异性100%（Choet al，1996）。但是取决于猪场情况和采样动物的日龄结果可能有所差异。单个反应（在一堆阴性动物中的一份阳性样本）应该通过其他方法来确认是否阴性，例如间接免疫荧光，蓝耳PCR可以用来表明是最近发生的感染(Charbonneau,2010)。另外一种确认蓝耳阴性的状态是对某个动物重复采样或者对其同一圈的其他猪（至少10天以后），以确保没有血清阳转或者散毒给其他动物。

另外一个需要解释的是抗体使感染产生的还是母源抗体。需要对那么看清来抗体水平比较低的动物采样。这些信号不一定是假阳性，但是他们不一定反应的是目前或者现在的感染。那么解决这个问题就是对尽量大的育肥猪采样，他们母源抗体基本下降了，必要时对哨兵动物采样。另外需要注意的是IFA和PCR检测都是毒株特异性的。

1.2 PCR

要记住设计PCR检测程序的时候评估蓝耳病毒的流行率是至关重要的，可以确保很高的敏感性和特异性。一个PCR阴性的结果并不能保证单个动物没有被感染。

1.2.1 血清

虽然有很多PCR检测的方法，他们都有很高的特异性和敏感性。对于定量PCR单个样本检测，敏感性是95.5%，特异性是100%，用的是SYBR Green RT- PCR (Martinez e t  a l,2008).因此各个实验室用PCR出现假阳性和假阴性都千差万别（Truyen e t  a l,2006;  Zimmerman,2008 ）。通常会将血清样本混样后送到实验室进行检测，因外PCR检测太贵了。混样之后会降低敏感性，5：1混样降低到84.5%，10：1混样降低到82%（Carmichael e t  a l，2010）。混样的特异性分别是5：1为99%，10：1为97.7%。但是，当方法的到，一些猪群的5：1和10：1的检测敏感性和特异性也可以在100%。

1.2.2口腔液

目前又报道一种新的蓝耳检测方法（Zimmerman  et  a l，2007;Weeks e t  a l,2010）。口腔液收集后可以做PCR检测。研究表明口腔液可以代替血液进行蓝耳病毒检测。

2.使用哨兵猪

通常在蓝耳净化项目中，使用抗体阴性动物来测试是否猪群还有病毒循环。哨兵动物需要跟厂里的其他动物关在一个场外的隔离佘进行测试，测试猪群是否还在排毒（Torremorell e t  a l，2003）。哨兵动物也可以跟阳性母猪的后代关在一起，以确认后代是否是阴性。在这个方法里面，哨兵猪跟断奶猪关在一起（Torremorell e t  a l，2000）。哨兵动物需要平均分布在抗体阳性猪群内，比例大概是一圈保育猪一头哨兵动物（Torremorell e t  a l，2002）。在一些方法中，哨兵动物先在入群之前做测抗体，然后入群以后每个月测一次，哨兵动物转走4周以上再测下哨兵动物的抗体（Torremorell e t  a l，2000）。在另外一些程序中，哨兵动物会持续在猪群里面待上2个月，每周检测直到转走（Alfonso ET a l，2005）。只有猪群已经非常肯定是不会排毒了才将哨兵动物放进去。

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