进一步,用IFA法测定感染母猪样品中抗PEDV的病毒中和抗体滴度。在该实验中,每个孔中使用了50个TCID50的PEDV,这表明在感染后24小时有大量的感染细胞(图2)。我们的数据显示,在未感染PEDV的母猪血浆中,病毒中和抗体滴度高达16。但是,在感染母猪中,所有四个感染组的病毒中和抗体滴度都非常高,滴度为512(图3A),这表明即使在6个月后,初产和经产母猪的病毒中和抗体滴度在血浆中仍然很高。所有感染母猪口腔液和粪便样品中的病毒中和抗体滴度均<8(图3B和C)。
图2 图片显示PEDV感染母猪血浆样本中病毒中和抗体反应 A 用50个TCID50病毒进行中和抗体实验,感染24 h后免疫荧光(IFA)检测显示有相当数量的感染细胞。 B 将PEDV未感染母猪和感染母猪的代表性实验血浆样品分别按1:8 ~ 1:1024进行倍比连续稀释,混合PEDV的TCID50为50;用该混合物处理的Vero细胞进行IFA和200倍放大检查。病毒中和抗体滴度表示为测试样品的最高稀释比的倒数,该稀释比与病毒对照相比,病毒诱导的荧光焦点单位减少了90%以上。
图3 PEDV感染母猪的病毒中和抗体滴度 (A)血浆、(B)口腔液和(C)粪便样品采用免疫荧光法检测病毒中和抗体对PEDV的效价。病毒中和抗体滴度确定为测试样品稀释倍数的倒数,诱导大于90%的病毒感染抑制。每条线代表6头母猪的病毒中和抗体滴度平均值±SEM。小写字母表示未感染和感染PEDV的相应初产和经产母猪组之间差异有统计学意义(“a”P < 0.05,“b”P < 0.01)。 |
上一篇:春季养牛推荐的防疫程序
下一篇:鸡群免疫需要注意的六大问题