仔猪流行性腹泻病毒与大肠杆菌混感的诊治

引起仔猪腹泻的传染性因素有很多，主要分为病毒性病原和细菌性病原两类。常见的病毒性病原主要包括猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪轮状病毒（PRoV）、猪细小病毒（PPV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪伪狂犬病毒（PRV）等，尤其肠道病毒感染仔猪后，临床症状表现相似、病理变化差别不大，容易引起误诊，耽误疾病的及时防治。在这些肠道病毒中，PEDV对哺乳仔猪的危害最重，发病率可达100%，病死率30%～80%。患病猪是PEDV的主要传染源，此外，携带PEDV的野猪是病毒的储存宿主，对该病的流行和传播具有重要作用。2010年起，我国的许多猪场大规模暴发PED，初生仔猪死亡率达90%以上，原来的免疫方式和疫苗不能控制PED发生，原因在于PEDV发生了重要变异。2013年5月，美国首次发现PED，传播力强，致使美国31个州的商品猪存栏量在18个月内损失10%。

细菌性病原主要为大肠杆菌（E.coli），随着养猪业规模迅速扩大，仔猪黄痢和仔猪白痢在临床上最常发生，其发病率和死亡率在仔猪疾病中占据首位，极大阻碍了养猪业的健康发展。由于E.coli血清型复杂，易产生耐药菌株，如何有效地防治该病正面临着巨大的挑战。

PEDV与E.coli是目前引起仔猪腹泻最主要的病原，当仔猪同时感染PEDV与E.coli时，会给养猪场造成严重的经济损失。现将一例仔猪PEDV与E.coli混合感染的情况报道如下。

1 发病情况

齐齐哈尔市泰来县某一体化养猪场共养殖生猪1300多头，2022年4月下旬，母猪与新生仔猪陆续发病，母猪主要表现为呕吐、喷射状水样腹泻，精神状态良好，食欲正常，持续1周后康复；哺乳仔猪出生后第2天，开始持续水样腹泻，后变为白色稀便，精神沉郁，食欲减退，3～5d后陆续出现死亡。畜主前期用过头孢噻呋钠、庆大霉素、环丙沙星及补液盐等药物，效果不佳，至来就诊咨询时，仔猪已陆续死亡25头。

2 剖检变化

对刚死亡的2头小猪进行剖检，肝脏局部坏死；肾脏有密密麻麻点状出血；脾脏 边缘出血、梗死；小肠壁变薄，肠系膜出血，肠内充满黄色液体。

3 实验室诊断

3.1病毒检测

1）病料处理 取脾脏、肾脏、脑、淋巴结等组织及肠内容物约2.0g，放于研磨中，剪碎，加入1mL生理盐水研磨，磨碎后放入EP管中，6000rpm离心3min。

2）RNA提取 取上清液按照相关说明进行DNA和RNA的提取，获得模板DNA和模板RNA。

3）PCR扩增 设计好程序，在PCR扩增仪上进行TGEV、PEDV、PRoV、CSFV、PRRSV、PRV的扩增。

4）电泳 取PCR或RT-PCR产物点样于琼脂糖凝胶孔中，以110V电压于TAE电泳缓冲液中进行16min的电泳，在凝胶成像系统上观察结果。第2泳道，在508bP左右处出现亮带，说明猪流行性腹泻病毒阳性，其余病毒阴性。

3.2 细菌检测

无菌取仔猪的肝脏、脾脏组织接种于琼脂培养基，通过麦康凯和伊红美蓝鉴别培养基、革兰氏染色及菌体形态，确定从仔猪体内分离的菌体为大肠杆菌。

4 药敏试验

将分离的菌均匀涂抹到营养琼脂平板上，选择6种常用抗菌药（头孢噻呋钠、庆大霉素、环丙沙星、多西环素、磺胺间甲氧嘧啶、卡那霉素）均匀放置于平板上，培养过夜。结果显示，该菌对卡那霉素中度敏感，对其它抗生素不敏感。

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