猪圆环病毒-支原体二联疫苗免疫攻毒试验

2）PCV2d攻毒4周后，所有PCV2d攻毒猪只实施安乐死。取纵膈淋巴结、腹股沟淋巴结、肺脏组织和肠系膜淋巴结检测组织中的病毒载量，统计试验组和对照组的差异。

3）M.hyo强毒连续气管攻毒3次，4周后实施安乐死，根据欧洲药典评估肺部病变损伤，对肺损伤评分加权统计对比试验组和对照组的肺部病变严重程度。

1.3.2 试验室检测

病毒载量检测：采集到的所有样品集中统一采用LSI生产的q PCR试剂盒定量检测PCV2病毒载量，按说明书操作进行。

1.3.3 屠宰场肺部病变评分

猪只实施安乐死后，所有M.hyo攻毒组猪只肺脏通过诗华肺计划软件对肺部病变评分。

2  结果

2.1 血清病毒载量测定

由图1可知，诗圆静免疫组相比PBS对照组在免疫后2周即可产生免疫力，极显著降低攻毒后血清中PCV2d的病毒血症（P＜0.01），在PCV2d感染风险高的地区免疫诗圆静可有效降低因病毒感染导致的临床症状的风险。

图1 血清中PCV2d病毒载量测定（P＜0.01）

2.2 组织中病毒载量测定

2.2.1 肺脏组织中病毒载量测定

由图2可知，诗圆静免疫组在免疫2周后PCV2d攻毒，攻毒4周后安乐死肺组织中的病毒载量相比PBS对照组显著降低，由PCV2d感染引起临床症状的风险极显著降低。

图2 肺脏中PCV2d病毒载量测定（P＜0.01）

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