2.2 没食子酸 没食子酸(GA,Gallic acid)是一种多酚类有机化合物,多从掌叶大黄、大叶桉、山茱萸等植物中提取,在食品、生物、医药、化工等领域有广泛的应用。没食子酸作为具有强抗氧化性的一类天然酚酸,目前已被国家批准为可以用作食品的主要抗氧化剂使用,除了抗氧化之外没食子酸还具备抗菌功能,对大肠杆菌感染和革兰氏阴性菌具有很强的抑制作用。实验证明,向冷冻保存培养基中添加50 μg/mL没食子酸可显著改善人的精子形态、活率、活力和DNA完整性,并减少DNA片段化和脂质过氧化。ⅰnan? ME等人在Honameli山羊精液冻融后,在Tris基精液稀释液中添加浓度为1 mmol/L的GA对Honamli山羊精液冻融后的精子参数均产生积极效应。因此应继续使用不同剂量和制剂组合对其他物种进行进一步研究。Gungor S等人在Tris基稀释液中冷冻保存公羊精液时补充2 mmol/L GA可增加猪精子解冻后的运动能力,而补充0.05 mmol/L GA可增强线粒体功能(见表2)。目前,没食子酸在猪精液冷冻保存技术当中的研究应用甚少,未来将会是重要的研究方向。
2.3 丹参素 丹参素是一种优秀的天然抗氧化剂,该化合物大量存在于中草药丹参中,能清除超氧阴离子,保护细胞线粒体不受氧自由基脂质过氧化的影响。使超氧化物歧化酶(SOD)的含量提升,降低自由基产物丙二醛(MDA)的含量,对心血管疾病和其他健康问题具有治疗作用,这些作用背后的机制包括抗氧化、抗凋亡等。因此有试验表明,添加丹参多糖(SMP)可显著提高解冻后的精子活率、超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、过氧化氢酶活性。在冷冻过程中,SMP能防止猪精子发生过氧化损伤,提高冷冻-解冻过程中的精子活力和产仔数。在猪精液常温保存稀释液中添加不同浓度的丹参素能够不同程度地改善精液保存质量。其中,25 μmol/L丹参素使精子活率、质膜和顶体完整率、T-AOC(总抗氧化)水平和SOD活性得到有效提升,MDA含量明显下降。Xuekai Tian等人试验证明,17℃下不同浓度丹参素加入猪精液稀释溶液保存效果不同。与对照组相比,补充丹参素的猪精液样品表现出的氧化应激对精子的影响降低。补充30 μmol/L丹参素能使精子活力、质膜完整性、顶体完整性和抗氧化能力显著提升。由表3可以看出,丹参素对猪精子具有显著的保护作用,研究价值潜能巨大。但目前相关研究甚少,未来可尝试将丹参素应用于猪精液的冷冻保存技术并分析出最佳添加剂量,进一步提高猪精液的冷冻保存效果。 |
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