猪性控精液技术应用研究的进展

4、PCR法鉴定胚胎性别

聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）是一种体外扩增技术。在进行胚胎性别鉴定时，通常选择Y染色体上的性别特异基因（如SRY基因）进行扩增，根据是否可以扩增特异基因来判断胚胎性别。目前胚胎鉴定的PCR法主要有常规PCR、巢式PCR、双重和多重PCR。孙俊丽等利用巢式PCR技术，对猪X和Y染色体上牙釉质基因（Amelogenin gene，AMEL）进行胚胎性别鉴定，试验结果显示，经PCR产物片段扫描后雌性胚胎只有一个峰值，雄性胚胎有两个峰值。尹智等利用SRY和zfy/x基因的特性，采取双重PCR技术对6只30 d左右的猪胚胎的性别进行鉴定，结果显示SRY序列扩增后，一个样品出现两个扩增带为雄性，剩余无特异扩增带为雌性。李小平等根据猪的SRY基因和GAPDH基因序列合成两对引物，通过双温多重PCR技术对猪进行早期胚胎性别鉴定，结果显示只能扩增GAPDH基因片段的为母猪，对SRY基因片段和GAPDH基因片段都能够扩增的为公猪，且试验中减少一步程序，可进一步缩短试验时间，减少精子损伤。

5、展望

性别控制技术对畜牧业的发展有着重要意义。当前性别控制技术正在逐步完善，许多存在的问题都已被解决，但仍有部分技术难题一直存在，如损伤精子、分离时间长等，阻碍畜牧业的发展。流式细胞仪在性别控制技术中被广泛应用，但对于猪性控精液的发展和应用还不成熟。利用TLR7/8在X、Y精子中的蛋白表达差异进行精子分离的试验中取得了较好的成绩，可望在日后的研究及生产中得到更多的运用。目前对于猪性控精液的研究与应用，相较于牛羊等产业还处于落后状态，但随着科技的进步和新技术的发掘，相信一定能够填补空缺，促进畜牧业更好的发展。

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