猪肉中氟苯尼考残留量高效液相色谱-串联质谱检测方法的建立
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3.2 添加回收率与精密度 对10 ng/mL、500 ng/mL、2 000 ng/mL三个样品添加浓度进行回收率测定，添加回收率与精密度结果见表1和表2。 4 讨论 4.1 氟苯尼考残留量检测 氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺的提取方法有许多，提取试剂通常为乙酸乙酯、乙腈、甲醇和丙酮等。比较不同的提取试剂对回收率的影响，甲醇和乙腈提取率较差，回收率较低；氟苯尼考胺为弱碱性物质，用乙酸乙酯提取时加入适量氨水。提取效果更佳，回收率也更高。相对于用丙酮或二氯甲烷提取，用乙酸乙酯加氨水混合后提取，带入的干扰物质较少，可以进一步简化净化过程，无须固相萃取小柱的净化，极大节约了样品前处理的成本，故本试验选择乙酸乙酯氨水混合溶液为提取试剂。 用强阳离子交换固相萃取柱进行净化时，氟苯尼考、氟苯尼考胺的回收率为70％～75％，在进行对比试验时，不过柱处理，将备用液直接氮吹，之后用水复溶，经过两次正己烷净化处理后，氟苯尼考和氟苯尼考胺的回收率均能达到85％以上，并且净化液在通过0.22 μm的滤膜时无阻力，滤液清澈，说明此方法符合要求。 本研究流动相A为0.1％氨水，流动相B为乙腈，弱极性的氟苯尼考保留性较强，而极性较强的氟苯尼考胺保留性较弱，保留时间不到2 min，因此选择低流速0.3 mL/min以延长氟苯尼考胺的保留时间。氟苯尼考质谱条件较为成熟，负模式电喷雾离子源定性离子为 －184.9，定量离子为－335.9。氟苯尼考胺为碱性样品，在正模式电喷雾离子源扫描下，130.1为定性离子，229.9为定量离子。在此条件下其丰度值大，受杂质干扰小。本试验中，在氟苯尼考胺保留时间之前，通过切换阀将流动相中强干扰物质切换到废液中，可以减少对目标物的干扰。 4.2 方法学评价 本研究建立的氟苯尼考残留量检测方法，其检测限和定量限分别为5 μg/kg和10 μg/kg。在10 μg/kg～4 000 μg/kg范围内，氟苯尼考和氟苯尼考胺在各组织的空白添加标准曲线线性关系良好，相关系数均在0.99以上。各组织空白样品添加浓度在10 μg/kg、500 μg/kg和2 000 μg/kg时，回收率均大于85％，批间和批内变异系数均小于3％。该方法适用于猪可食性组织中氟苯尼考残留量的测定。 |
