猪精液稀释程序与要点

一、稀释前的准备  

1. 采精室的准备

2. 实验室的准备

1）在稀释前2h左右做好稀释液置于38℃水浴锅内保存（保存期24小时内）。

2）将室温维持在25℃左右，稀释过程中严禁开关门窗，以防室温升降明显。  

3）将稀释器材预热保存（集精杯处理后，杯、盖分离置于38℃干燥箱预热，输精瓶，量桶，玻璃棒，温度计，盖玻片，载玻片置38℃干燥箱预热，显微镜，精子密度仪，全自动精子质量分析系统，恒温载物台，电子称调整精准等）。

二、精液稀释处理  

1.采精员将采集的精液（无菌操作）通过双层窗口交给实验室工作人员。  

2.稀释人员洗手、消毒、更衣后将集精杯于采精窗口内取出并迅速检查精子活力、密度、颜色、气味并做好记录。注意：此过程中不要将精液袋从保温杯中取出。

3.将精液袋取出置于预热后的量桶内称重并测温。  

4.将稀释液从水浴锅内取出，调整温度与原精液相差不超过1℃

5.利用玻璃棒引流缓缓把稀释液注入原精液。

注意：

1）温度计选择同一厂家（在相同环境下刻度相同）；

2）不要将计算所得的稀释液的量一次性的注入精液中，过程中要阶梯性的注入并检查精液稀释过程的活力，用玻璃棒缓慢同一方向均匀搅拌。

三、精液品质的检查  

原精活力：作直线运动的精子占精子总数的百分比；精子密度：每毫升精液中所含的精子数（2-3亿左右）；射精量：成年公猪300-500ml.青年公猪200-300ml 颜色：乳白色或浅灰色，精子的密度越高色泽越浓。 气味:略带腥味；采精频率：成年公猪每周2-3次为宜，青年公猪每周1-2次为宜，精液稀释倍数：要求每个输精剂量含有效精子数30亿以上，输精量 80-100ml,以确定稀释倍数。合格精液标准：150ml以上，颜色正常，活力0.7以上。

精液品质检查可应用相差显微镜、精子密度仪或全自动精子质量分析系统进行检查。

四、精液稀释完成后迅速分装记录

将瓶装精液置于保温箱（泡沫箱）中盖上毛巾让其于室温中缓慢降至20-25℃在将其放入17℃恒温箱保存并每隔8-12h缓慢翻动一次，以防精子堆积。  

注意：分装后要将瓶内空气挤出拧紧瓶盖，以防空气中微生物对精液的影响和防止运输时精液的剧烈晃动。

五、消毒清洁处理

稀释人员要对实验室操作流程熟悉，稀释过程中要精准，迅速，以防止精液温度下降过快，整个稀释过程结束后要清理实验室，消毒清洗使用工具，用毛巾侵入消毒水擦拭室内台面、水龙头、地面。确认无误后方可下班。