犊牛感染性出血性腹泻的输血疗法

5、交叉配血试验

5.1 采血

对供血牛和受血牛（患牛）分别采集10 mL血液，其中5 mL血液置于促凝管，另外5 mL血液置于抗凝管，采集的血样分别进行标记，标记需清晰明确、不易去除。

5.2 血清分离和红细胞生理盐水混悬液制备

将供血牛和受血牛（患牛）的已经凝固血样，以2000 rpm，3 min离心分离血清，析出的血清分别单独转移到无菌试管中备用。

将采集的供血牛和受血牛（患牛）的抗凝血液加10倍体积生理盐水，以2000 rpm，3 min反复离心清洗5次，弃去上清即为100%红细胞泥，吸取20 μL，加入含有3800 μL生理盐水的试管中，吹吸混匀即成5%红细胞生理盐水混悬液。

5.3 交叉配血步骤

选取凹面载玻片或普通载玻片一张。两个凹窝，分别用记号笔标号A和B，A凹窝进行交叉配血试验主侧试验，滴加受血（患）牛的血清50 μL（2滴）和供血牛的5%红细胞生理盐水混悬液25 μL（1滴）；B凹窝进行交叉配血试验次侧试验，滴加供血牛的血清50 μL（2滴）和受血（患）牛5%红细胞生理盐水混悬液25 μL（1滴）；血清与红细胞悬液滴加后，充分进行上下、左右震荡混匀或分别用牙签搅拌均匀，室温下静置5 min到10 min，在显微镜下观察结果。

5.4 交叉配血结果判定

在显微镜下观察主侧与次测试验均无凝集反应，表示配血完全相合，可以输血；如主侧管无凝集及溶血，而次侧出现凝集，但凝集较弱，可以输少量(不超过200 mL)血液；不论何种原因导致主侧有凝集时，坚决不可输用。

6、采血和输血

交叉配血合格后根据输血量对供血牛进行采血。

6.1 采血

无菌盛血瓶或血袋需预先注入5%柠檬酸钠抗凝剂，抗凝剂与血液的比例为1:9~10，每个盛血瓶或袋抗凝剂总量不能超过50 mL，即每个盛血瓶或袋最多采集450 mL血液。

对供血牛确实保定，在牛颈部近心端1/3处用止血带进行结扎使颈静脉弩张；再用20号采血针连接无菌盛血瓶或袋采血，让血液沿瓶或袋壁缓慢流入，边采血边轻微摇晃输血瓶（袋），使血液与抗凝剂均匀混合。采血接近完成时，解开结扎止血带，达到采血量拔出针头。实际采血量应该比输血量多5%。

6.2 输血步骤

将采集好的含有抗凝剂的全血尽早使用16号针头通过颈静脉输入到患（受血）牛体内；若使用一次性输液器连接储血瓶或袋应剪掉过滤网；血液输入速度开始时控制在每分钟3 mL到5mL，同时密切观察犊牛10 min，看其是否有输血反应，如有震颤、焦躁不安、不停嘶鸣、站立不稳、呼吸频数、心跳加快、呕吐、眼结膜充血、流泪、流涎和抗拒等异常，立即停止输血，30 min后症状可自行消失；如无异常，10 min后可将速度调至每分钟5 mL到15 mL。输血完毕后留观30 min。

6.3输血间隔

轻度出血患牛：如需连续输血间隔48 h，即第一次输血后间隔两天再次输血。

中度出血患牛：需连续输血，间隔为24 h到48 h，即第一次输血后间隔一到两天再次输血。

重度出血患牛：需连续输血，间隔为24 h，即每天输血一次，必要时可上、下午各一次。

7、注意事项

采血和输血时所用的器具或部位，均须消毒灭菌；患有呼吸道疾患、肾脏或心脏疾病的犊牛少输、慢输；可左右两边同时进行输血和输液，也可先输液，待有尿后再进行输血；供血牛采血后需要输入等量林格氏液；不能选择围产期奶牛作为供血牛，采血时容易导致流产。

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