蓝耳病灭活苗如何有效评估？

最近，蓝耳灭活苗都在密集发布，关于蓝耳灭活苗的效果如何去评估是每个养殖场户都想知道的答案。2021年10月21日，第十届李曼中国养猪大会现场，杭州佑本动物疫苗有限公司技术服务总监赵福相详细探讨了关于PRRS灭活苗免疫效果评估方案和PRRS灭活苗免疫保护评估在生产上的应用。

三方面，做好实验室蓝耳抗原抗体评估

赵福相表示，评估蓝耳苗本身质量并不难，但如何科学客观的评价疫苗的免疫效果，目前鲜有报道。佑本多年致力于蓝耳灭活苗防控探索，仅2020年已累计超过5000万·次/猪免疫，本次基于生产实践运用阐述蓝耳灭活苗免疫效果评估。

众所周知，蓝耳病有三个突出危害。一是引起母猪流产为主的繁殖障碍，二是造成保育猪（5-9周龄）高发病、高死淘率的呼吸道病，三是造成猪只的免疫抑制。如果评估母猪流产为主的繁殖障碍统计数据即可，评估保育猪的话则可以统计死淘率，那么免疫抑制该怎么评估呢？

从生产成绩的评估来看，赵福相告诉大家，首先母猪免疫之后效果的评估主要通过两个指标，一是繁殖指数（配种分娩率、流产率），二是窝仔指数（窝均产健仔数、窝均断奶健仔数、窝均断奶重）。其次，育肥猪群免疫后效果的评估在保育阶段的评估也是通过两个指标，一是阶段性评估，蓝耳一般来说看70日龄成活率即可，精细一点则可以统计70日龄的增重。二是全程评估（出栏成活率、日增重）。

赵福相认为从生产成绩评估疫苗效果是一目了然的，但是要想测出抗原和抗体等各方面的水平需要实验室检测的评估。实验室检测评估主要分为三大方面，首先是特异性免疫保护评估，包括体液免疫和细胞免疫的评估。其次是病毒载量的评估。最后是攻毒实验，赵福相强调要想做攻毒试验必须具备两个条件，第一做这个实验的人或团队是必须了解蓝耳病本身的，第二要懂灭活苗，否则是做不出攻毒实验的。

活+灭，既能产生细胞免疫又能产生良好中和抗体

关于蓝耳病灭活苗如何评估，赵福相从体液免疫和细胞免疫重点介绍了特异性免疫保护评估。据了解，体液免疫评估检测最多的是N-蛋白(核衣壳)抗体，根据实验表明，N蛋白抗体有四个特性：一是血清学N抗体，不能区分野毒感染还是免疫疫苗产生的抗体，因此血清诊断方法不能有效的区分猪群是之前感染过蓝耳还是免疫过蓝耳。二是没有蓝耳感染的过程就不会产生N抗体，因此阴性猪单独免疫灭活苗不会产生N抗体。三是由于N抗体与保护无关，不能作为免疫保护评估，也不适合评估蓝耳灭活苗免疫保护效果。四是活苗、活+灭或阳性猪群免疫灭活苗时，测定N蛋白抗体有一定参考价值。

体液免疫除了检测N蛋白抗体之外，还会检测中和抗体(M蛋白、GP5)。中和抗体可以防控蓝耳的急性感染。赵福相认为，中和抗体（M蛋白或GP5 抗体）免疫后能产生针对疫苗同源毒株的中和抗体，但对异源毒株感染不能提供完整保护。其次，同一毒株反应最强烈，异源毒株差异大，加之中和抗体产生晚、滴度低，在未能标准化时不能作为常规免疫学诊断。

其实，在特异性免疫保护中，蓝耳的免疫保护主要靠细胞免疫，细胞免疫可以防止持续带毒，一般细胞免疫检测指标为干扰素（INF）、细胞因子（IL、肿瘤坏死因子、集落刺激因子GM-CSF Cytokines: IL、TNF、GM-CSF）。而实际生产中以检测干扰素INF-γ、肿瘤坏死因子TNF-ɑ较多，细胞免疫在攻毒试验时是很好的评估指标，但在生产实际中，由于不能区分野毒感染还是免疫产生，故不能做免疫效果评估。

蓝耳灭活苗免疫阴性猪从理论上讲，因没有感染过程可能不产生细胞免疫。赵福相表示，佑本推荐蓝耳疫苗活+灭，既能产生良好细胞免疫，亦能产生良好中和抗体，并且细胞免疫最佳检测时间是免疫以后6-12周。

病毒载量是评判蓝耳免疫保护的终极指标

因为蓝耳免疫后体液免疫及细胞免疫的时间不一致，目前，单独使用任何抗体或细胞免疫评估都不能客观体现蓝耳灭活苗免疫保护。赵福相认为，病毒载量才是评判蓝耳免疫保护的终极指标，检测病毒载量可以从病毒血症载量、组织病毒载量、口腔液病毒载量（反应排毒情况）三个地方入手。

据介绍，蓝耳病毒载量有如下规律：

急性感染以组织中含有高载量病毒和持续1个月的病毒血症为特征，之后为持续感染期，病毒在一级淋巴组织持续低水平复制。病毒完全被清除的时间至少需要150天，成年猪排毒期为45-86天不等。而且胚胎期感染可能终生带毒，这样的猪群十分危险，此外带毒规律呈现日龄越小感染后持续带毒时间越长的特点。

最后，赵福相表示，正确的免疫保护评估建立在有效免疫方案的基础之上，采样方案正确与否会影响评估免疫效果的真实性，而免疫后4-12周之间为有效检测采样时间。N抗体、中和抗体、细胞免疫有一定参考意义，但都不能区分是免疫抗体还是野毒抗体，建议以检测病毒载量为免疫保护最终依据。