动物源性饲料检测技术研究

疯牛病作为一种神经性、渐进性的动物疾病，其传染的的频率快、范围广，危害性较大，直接影响动物和人的安全。疯牛病最早暴发在欧洲地区的英国，为英国以及欧洲养殖业带来了极大损失。此类疾病发生主要原因是饲料中的牛肉、羊肉、脑、脊髓、内脏，污染了朊病毒，并且牛羊制品也会携带朊病毒。使用这些原料制作饲料，会传播朊病毒，对动物以及人类构成威胁。

1、显微镜检测技术

显微镜检测是一种应用较早的检测技术，美国和加拿大最先使用，距今已有40年之久，也是欧盟唯一承认的动物源性饲料官方检测方法。显微镜检测主要低倍镜检测和生物显微镜检测。低倍镜主要用于监测饲料的颜色、形状、粒度、硬度、气味等各项物理性状。而生物显微镜主要检测饲料当中的细胞、组织结构。生物显微镜检测时，一般需要将动物单蛋白粉碎、其粒度非常小，细胞结构容易被破坏，所以检测的难度相对较大。若要使用生物显微镜检测，需要研究者掌握扎实的生理以及解剖知识才能够开展相关操作，并获取较为准确的结果。饲料中的动物源性成分一般都是动物骨骼和肌肉，其中动物骨骼在133℃高温下持续20min依然保持稳定，这可作为显微镜检测技术的关键点。而用于显微镜检测的肌纤维片段相对短小，且肌肉纤维的宽度和动物的影响状况、饲料加工情况息息相关，所以无法将其作为动物源性饲料的判断依据。所以在进行低倍镜观测时，哺乳动物的骨组织呈现出不透明的白色和乳白色石块，禽类的骨组织在粉碎时更加容易破碎，末端呈现出尖锐的状态。在高倍镜下观察，哺乳动物骨组织表面可以看到椭圆形或近似圆形的缝隙，缝隙之间有着细小的微管相连接，而鱼骨组织一般都是呈现出平行排列的状态，骨裂拉长呈现出纺锤形，裂缝之间有着明显的微管结构。经验丰富的高倍镜检测技术人员，可以检测到最低添加量0.1%的动物源性饲料。

2、PCR检测技术

PCR检测技术一般分为两种手段，分别是传统PCR检测技术和实时荧光定量PCR检测技术。

2.1 传统PCR检测。PCR是一种用于放大圹增特定DNA片段的分子生物学技术。动物细胞的细胞核和线粒体都有DNA，可作为PCR检测技术的靶序列。线粒体DNA是一个比较理想的用于PCR检测的靶基因，由于不同动物体存在许多拷贝线粒体基因组的模板数量远远超过了细胞核染色体基因模板，这就可以有效的增强PCR检测的灵敏度。此外，由于许多动物线粒体的基因组已经被完全测定，并且很多已知的基因组能够找到保守核苷酸序列，所以结合特定的引物，可有效提升PCR检测的特异性。

2.2 实时荧光定量PCR检测技术。该法是指在PCR反应体系中加荧光基因，利用荧光信号积累时监测实时荧光定量PCR技术，能在原有的反应体系当中，加入一条荧光标记探针，当探针保持完整时，报告基团的荧光信号就被淬灭基团所淬灭。通过收集荧光信号，可以对整个PCR检测整体过程进行实施监控和动态分析。可以有效的避免传统PCR检测技术的耗时耗力，适合大批量的饲料样品检测。

3、结束语

要切实有效保障饲料的健康安全、避免动物源性物质在饲料中出现，应该研究多样化的动物源性饲料检测技术，最大程度上确保动物及人类的生命安全。