产品监测
动物源性食品中霉菌毒素的检测——杂色曲霉素
|
ST产生菌及ST在世界各地粮食及饲料中的污染很常见，甚至在潮湿的房屋内也可检出ST的污染。Wilson等认为在粮食收获前后最易有真菌生长或受霉菌污染的农产品主要包括玉米、花生、棉籽、稻米、坚果和水果。肉、奶和蛋等动物类产品也可因为动物摄入被污染的食物而遭到污染。国内学者研究发现，我国各地粮食中ST的污染非常普遍，其中以小麦最明显，污染率最高可达100%。Wareing等对市场上的木薯进行了调查，发现所采集的10个样品中ST含量在0.17～1.67μg/kg。 4 国内外限量要求 由于ST的毒性大，而且各类动物都易感染，容易引起中毒，故需要规定饲料和日粮中ST的安全剂量，但是目前给出具体的限量标准的国家很少。捷克和斯洛伐克规定大米、蔬菜、面粉、禽肉、猪肉和牛奶中的MRL为5μg/kg，其他食物中的MRL为20μg/kg。我国杨曙明等推荐饲草及日粮中ST的允许量为：饲草≤200μg/kg，大麦和玉米≤100μg/kg，豆饼和花生饼（粕）≤1500μg/kg，配合饲料≤80μg/kg。 5 样品前处理方法 5.1 样品提取 5.1.1 甲醇法 称取20g饲料，洗净烘干，经粉碎后过20目筛，之后置于具塞锥形瓶中，加80mL甲醇-4%氯化钠溶液（体积比9:1），振荡30min后过滤，收集滤液40mL，移入250mL分液漏斗中，再加入25mL 4%氯化钠溶液和25mL石油醚，振摇2min，静置分层。上层石油醚溶液置于锥形瓶中，下层溶液仍移入原分液漏斗中，再用25mL石油醚提取1次。最后将2次上层的石油醚溶液合并，加入25mL甲醇-氯化钠溶液（55:45，V/V），振摇30s，将下层并于原甲醇水层中，重复用甲醇-氯化钠溶液（55:45，V/V）提取2次，以提取该层的ST。下层溶液合并后加30mL三氯甲烷，振摇2min，静置，待上层浑浊液有部分澄清时，即可将下层溶液倾倒至有约10g无水硫酸钠的定量慢速滤纸上过滤于蒸发皿中，于分液漏斗中再加10mL三氯甲烷，重复提取1次，将该下层溶液和用少量三氯甲烷洗滤的洗液一并放入蒸发皿中，将蒸发皿置于65℃水浴上蒸干，然后再在冰浴上放置2～3min，加1.0mL苯将残留物充分混匀，置入小试管中，或将以上蒸发皿中残留物用三氯甲烷移于浓缩管中，于65℃用减压吹气法浓缩至干，加入1.0mL苯，供色谱测定，此1mL样液相当于10g样品。 5.1.2 乙腈法 称取20g饲料，洗净烘干，经粉碎后过20目筛，之后置于具塞锥形瓶中，加入80mL乙腈-氯化钾溶液（90:10，V/V），振荡30min，过滤。收集样品液40mL，移入250mL分液漏斗中，再加入20mL正己烷，振摇，静置分层。当底层清晰时，弃去上层正己烷，再用20mL正己烷重复提取1次，弃去正己烷层，在乙腈-水层中加入10mL水和20mL氯仿，振摇。在上层清晰时，收集底层氯仿于蒸发皿中，上层再用10mL氯仿提取1次，合并氯仿，将蒸发皿置于65℃水浴上蒸干，然后再在冰浴上放置2～3min，加1.0mL苯将残留物充分混匀，置入小试管中，供色谱测定，此1mL样液相当于10g样品。 胡伟莲等分别用甲醇法和乙腈法对各种饲料及配合饲料进行ST的添加回收试验，ST的添加量为100μg/kg，测定回收率，并重复10次计算其回收率和相对校准偏差。结果见表4-3。同时随机取发霉鸭饲料、稻谷、玉米、豆饼和菜籽饼，也同时用甲醇法和乙腈法分别检测其中的ST含量。研究发现，用甲醇法和乙腈法测定饲料中ST的含量时，其回收率为88.1%～91.4%，同时RSD较小，重复性好，因此可以用于饲料中ST的快速测定。其中甲醇法所用试剂为常用试剂，毒性小，但操作过程相对复杂；乙腈法使用试剂乙腈有剧毒，但操作过程相对简单，故认为此两种方法都可以作为饲料厂简便快速检测ST的方法。 |