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动物源性食品中寄生虫的检测——华支睾吸虫

日期:08-12 作者:曲志娜 赵思俊等- 小 + 大

  5.2.3 酶联免疫吸附试验(ELISA)
  此方法检测华支睾吸虫病人血清中特异性抗体及用于流行病学调查,具有简便、快速、敏感性高、特异性强等优点,阳性率为88.8%以上,是目前较为理想的免疫检测方法。
  用双抗体夹心ELISA法检测该病患者血清中特异性循环抗原,明显优于检测抗体的方法。
  5.3 分子生物学方法
  首先是建立了PCR及其衍生技术,基于基因序列的分子生物学检测方法得以迅速发展,此项技术主要用于人的华支睾吸虫的诊断,其方法的特异性和敏感性都在70%以上。
  另外,LAMP检测技术根据华支睾吸虫18S rRNA基因设计和合成特异性引物和探针,建立RT-PCR检测体系。上游引物:5′-GCATTTGTATGGCGGTGTTA-3′,下游引物:5′-AACCTCTGACTTTCGCTCCA-3′,扩增产物约111bp;探针:5′-(FAM)AACTACAGCGAAAGCATTTGCCAAGGA(Eclipse)-3′,进入反应体系共40个循环。在进行华支睾吸虫实时PCR检测的同时,还对弓形虫、日本血吸虫、广州圆线虫等的DNA均分别用华支睾吸虫的特异性引物在同样的反应条件下进行PCR扩增,以确定是否有交叉反应。RT-PCR检测方法特异性好、灵敏度高,适用于华支睾吸虫现场的快速检测及定量分析。是一种新兴的核酸分子生物学检测病原体的方法,具有快速、灵敏、便捷的特点,灵敏性是PCR的10~100倍。

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