产品监测
动物源性食品中寄生虫的检测——华支睾吸虫
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5.2.3 酶联免疫吸附试验（ELISA） 此方法检测华支睾吸虫病人血清中特异性抗体及用于流行病学调查，具有简便、快速、敏感性高、特异性强等优点，阳性率为88.8%以上，是目前较为理想的免疫检测方法。 用双抗体夹心ELISA法检测该病患者血清中特异性循环抗原，明显优于检测抗体的方法。 5.3 分子生物学方法 首先是建立了PCR及其衍生技术，基于基因序列的分子生物学检测方法得以迅速发展，此项技术主要用于人的华支睾吸虫的诊断，其方法的特异性和敏感性都在70%以上。 另外，LAMP检测技术根据华支睾吸虫18S rRNA基因设计和合成特异性引物和探针，建立RT-PCR检测体系。上游引物：5′-GCATTTGTATGGCGGTGTTA-3′，下游引物：5′-AACCTCTGACTTTCGCTCCA-3′，扩增产物约111bp；探针：5′-（FAM）AACTACAGCGAAAGCATTTGCCAAGGA（Eclipse）-3′，进入反应体系共40个循环。在进行华支睾吸虫实时PCR检测的同时，还对弓形虫、日本血吸虫、广州圆线虫等的DNA均分别用华支睾吸虫的特异性引物在同样的反应条件下进行PCR扩增，以确定是否有交叉反应。RT-PCR检测方法特异性好、灵敏度高，适用于华支睾吸虫现场的快速检测及定量分析。是一种新兴的核酸分子生物学检测病原体的方法，具有快速、灵敏、便捷的特点，灵敏性是PCR的10～100倍。 |