禽病防治

禽腺病毒感染的诊断与防控

日期:08-01 作者:陈建勇- 小 + 大

  人工感染试验显示, 母鸡感染病毒2~6d后可以从鼻腔表面上皮检测到核内包涵体。感染后的第2~5天期间, 全身淋巴组织中可以检测到较低水平的病毒抗原。感染后的第3~5天期间可以观察到炎症病变, 卵巢漏斗部可以检测到病毒抗原。感染后的第8天, 囊壳腺首次检测到病毒复制, 但病毒从未在消化道上皮细胞中被检测到。肉鸡种鸡和褐壳蛋鸡发病最为严重, 白壳蛋鸡发病较轻, 死亡率一般很低。

  垂直感染病毒的鸡直到性成熟仍能保持无临床症状的感染。发病时, 最早出现的现象是蛋壳与正常的相比更白、更薄, 接着出现产软壳蛋和少壳蛋的现象。鸡蛋形状不规则, 蛋壳表面粗糙。同正常鸡蛋相比, 少壳蛋蛋白较少, 软壳蛋呈水样粘稠状。通常, 过一段时间后, 鸡群会恢复到正常的产蛋量水平。疫情一般持续3~8周。尽管EDS的症状很明显, 但诊断不能仅基于临床表现, 需要实验室确诊。因为有多种传染性或非传染性的病原也可以导致产蛋下降, 降低鸡蛋质量。

  尽管EDS的症状很明显, 但诊断不能仅基于临床表现, 需要实验室确诊。因为有多种传染性或非传染性的病原也可以导致产蛋下降, 降低鸡蛋质量。此外, 一些非传染性的因素如饲养密度过高、饲料和饮水质量差等因素也可以引起产蛋下降。
  病理剖检没有特别的病变, 可以观察到卵巢和输卵管轻微萎缩。输卵管和子宫 (蛋壳腺) 可以观察到病理组织学变化, 如上皮细胞严重变性、脱落。子宫腺体萎缩, 异嗜性细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润。子宫、输卵管峡部、阴道等部位的上皮细胞可观察到细胞核内包涵体。
  4 腺病毒感染的诊断
  对于家禽疾病的诊断一般首先基于病史、临床症状和病理剖检。这是对疾病诊断的重要步骤, 但并不是最终的步骤。很多疾病在临床症状和病变方面比较相似, 需要实验室诊断最终确诊。实验室诊断的方法可以是采用分离病毒的方法直接检测病毒, 也可以采用间接地检测抗体法。以往, 对于家禽腺病毒感染, 大多数情况下, 采用病理组织学观察核内包涵体, 免疫荧光检测抗原或者电镜鉴定抗原的方法。随着分子生物学技术的发展, PCR、Real-time PCR以及REA等方法已被运用于检测病毒DNA以及进一步对病毒鉴定和分型。
  采用鸡胚肝细胞 (CEL) 以及鸡胚成纤维细胞培养的方法分离病毒用于进一步鉴定以及判定病毒的致病性相当重要, 因为同一血清型病毒的不同分离株, 其致病性差异很大。交叉中和实验以及分子生物学方法对分离到的病毒进行分型或者确定新的血清型十分重要。
  EDSV可以使用鸭胚、鹅胚或者细胞分离。易感细胞系包括鸭和鸡胚肝细胞, 鸭肾细胞核成纤维细胞。病毒可以直接从染病母鸡的生殖道中分离到。
  最常见的血清学检测方法是用免疫扩散试验检测特定的抗原, 但这种方法不够敏感。特异性的ELISA以及IF (免疫荧光) 实验更为敏感。血清中和试验可以用于检测血清特异性的抗体, 但耗时耗力, 花费也较多。对血清学实验结果的解释比较困难, 因为健康和患病的禽类都会存在针对AAV的抗体。
  此外, 采用鸡红细胞的血凝抑制实验也可以用于检测EDSV抗体。免疫胶体金技术检测EDSV抗体的方法也已经有报道。
  5 禽腺病毒感染的防控
  5.1 防控IBH/HPS
  良好的生物安全措施是防控感染首要也是最基本的措施。精心管理, 加强禽舍环境及其设备的清理和消毒、限制来访人员, 做好疫苗的免疫接种工作在防控中也起着重要作用。
  在具有高度感染压力的国家, 该病已经通过疫苗得到较好地控制。疫苗通常采用病禽的肝脏, 用福尔马林灭活后制备, 也有采用灭活的染毒细胞制备的。有研究比较了两种采用病禽肝脏组织制备的灭活疫苗。一种疫苗不使用佐剂, 另一种疫苗经氯仿提取福尔马林灭活后, 以石蜡作为佐剂。油乳剂疫苗对10日龄的鸡进行皮下免疫, 所提供的保护力达到了100%, 一直到7周龄。不用佐剂的灭活疫苗的效果则相对较差。事实上, 疫苗的实际效果, 不同的研究报道差异很大。影响疫苗效果的因素也有很多, 养禽场需要根据实际情况进行。用于防控鸡包涵体肝炎 (IBH) /心包积水综合征 (HPS) 的疫苗也已有很多报道。多数情况下, 鸡包涵体肝炎 (IBH) 是通过垂直传播引起的, 疫苗在防控垂直感染方面有较好的效果。因为疫苗可以诱导母源抗体的产生。有报道称, 对种禽先后免疫针对FAV-4和CAV的疫苗, 可以有效地防控子代发生IBH/HPS。30~50周龄肉鸡种鸡免疫针对FAV-8和FAV-11感染的疫苗也能够有效地保护子代。
  5.2 防控EDS
  除了良好的生物安全措施外, 在蛋鸡产蛋前使用灭活疫苗免疫对防止产蛋数量以及质量下降十分重要。疫苗接种应该在14~16周龄时开始, 不过疫苗并不能完全抑制病毒通过粪便排毒, 只能减少排毒量。

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