动物源性食品中寄生虫的检测——弓形虫
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3 危害 免疫力正常的人感染弓形虫后通常呈隐性感染，一般无明显临床症状，一旦机体免疫力下降或免疫功能缺陷者感染后，可引起全身反应和多器官受损，严重时造成死亡。妊娠期间感染弓形虫可引起流产、早产、死胎，弓形虫可通过胎盘感染胎儿，造成胎儿先天性感染。胎儿出生后表现为一系列中枢神经系统症状及眼、内脏的先天损害。有些新生儿出生时无特殊体征，仅表现为低体重、贫血、黄疸等，但逐渐出现抽搐、脑膜炎及癫痫等神经系统病变，可引起智力发育障碍。 动物感染弓形虫后表现生长缓慢，饲料利用率下降，生产性能低下，长期带虫，严重时死亡；造成繁殖动物生产异常，流产、死胎，造成严重经济损失。其中危害最严重的是猪。目前，我国猪弓形虫病分布十分广泛，华北、华东、东北、华中、华南、西南、西北等地区均有该病发生的报道，感染率和病死率普遍较高。猪肉是人们生活中最主要的动物源性食品，弓形虫感染的猪及其肉制品对人类健康构成极大的威胁。感染弓形虫的猪通常没有明显的临床症状，但事实上隐性感染猪的组织内可能含有弓形虫的包囊，如果烹饪时加工不当或者由于个人习惯（如喜食不熟或生肉），则可能引发人的弓形虫感染。 Mendonca等用PCR技术扩增经处理的猪肉香肠样品，同时以处理的猪肉香肠样品进行小鼠动物试验，以IFA检测小鼠血清中的特异性抗弓形虫抗体，结果PCR的检出率为47.14%（33/70），小鼠血清为阴性，虽然结果表明猪肉香肠样品中不含有活的弓形虫，但PCR检出率高也能说明猪肉香肠受弓形虫污染较严重。如果香肠在加工过程中食盐浓度＜3.0%，盐渍时间＜3d，则不能有效杀死香肠中弓形虫包囊或速殖子。韩国于1997年暴发的2起共8人食源性急性弓形虫病均因食用未加热透彻的（野）猪的脾和肝引起。Dias等调查巴西隆德里纳市47份屠宰工人血清和149份（8个厂家）新鲜猪肉香肠进行小鼠生物学试验，结果发现血清阳性率分别为59.6%（28/47）和8.7%（13/149），认为新鲜猪肉香肠在弓形虫病传播中有重要作用。 4 诊断技术 根据临床症状、病理变化和流行病学做出初步诊断，确诊必须在实验室中查出病原体或特异性抗体，主要方法有病原学检查、血清学检测和分子生物学诊断。 4.1 病原学检查 4.1.1 直接涂片 取血液、血清、腹水或肝、肺、淋巴结等病料直接涂片吉姆萨或瑞氏染液染色，镜检，发现虫体可确诊。此法诊断弓形虫病非常准确，但检出率低，易漏检。 4.1.2 组织切片染色法 对病变组织进行冷冻切片，用免疫酶或荧光染色，不仅可以使包囊着色，还可以使散在的弓形虫速殖子及被染细胞内虫体着色，此法灵敏度高，特异性强，可提高虫体的检出率。 4.1.3 动物接种分离法和细胞培养法 将肝、肺、淋巴结等病料匀浆后，加5～10倍生理盐水混匀，过滤，离心，取上清液腹腔接种于易感动物小鼠，观察发病情况，可盲传几代，以提高检出率。这种方法有很强的敏感性和特异性，但是比较耗费时间。亦可将上述病料接种于离体培养的单层有核细胞中，细胞培养相比动物接种来说，敏感性低，但所需时间短。 4.1.4 卵囊检查法 将粪便用饱和氯化钠或蔗糖溶液（30%）漂浮，收集卵囊镜检，但检出率一般较低。 |