二、口蹄疫灭活疫苗对pH值的要求 口蹄疫病毒的衣壳蛋白是通过各种结构蛋白内各种氨基酸残基之间存在的共价键、氢键、电性等分子作用力缔结而形成,由5个原粒 组成 12S粒子之间连接面的部分含有高密度的组氨酸残基,由于组氨酸的pKa 值与引起口蹄疫病毒分解的pH值相近,因此研究者们认为pH值下降后组氨酸残基发生质子化,所以在12S粒子之间连接面内产生了静电排斥力,触发了口蹄疫病毒的分解。 在12S粒子连接面附近有一组酸性氨基酸残基,在多数 pH值下带负电荷,所以在12S粒子之间形成了静电排斥网,在微弱的静电吸引力与排斥力的共同作用下,146S粒子从组合态只需要吸收少许能量就能转变为过渡态进而分解为12S粒子。口蹄疫病毒受热容易分解为结构蛋白当中的个别氨基酸残基在12S粒子之间的连接面形成静电排斥作用导致的。146S粒子的稳定性在不同的血清型之间存在差异,O型和SAT型对酸和热的稳定性差,但A型和Asia1型相对来说更稳定。四种结构蛋白构成的五聚体由组氨酸聚合成病毒衣壳(75S),组氨酸残基电离常数大约为7.0,因此口蹄疫病毒对酸敏感,当环境pH低于6.0时,病毒就会发生裂解,降解成由五个前体组成的12S,这有可能是处于亚基蛋白VP2和VP3之间的组氨酸质子化导致的。在pH值为6.0时,几乎所有146S在3分钟之内全部裂解,虽然pH6.5条件下也发生了裂解,但是当146S裂解至大约60%的时候达到了平衡,继续储存时不会发生进一步的裂解,这可能是因为pH6.5接近裂解的中点pH,当pH在7.0至9.0之间时,只有少量的146S在储存1天后有所损失。目前按照不同文献报道146S最适保存的pH为7.2~7.6。 疫苗是一种特殊的兽用生物制品,从制造商到使用者的任何环节出现问题,都会影响其免疫接种效果,甚至免疫失败,延误疫病防控,给养殖户造成巨大经济损失。口蹄疫灭活疫苗冷链运输以及正确的免疫接种是保证免疫效果的关键因素,所以必须严格把控运输、保存及使用中的每一环节,确保其发挥预期效果。
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