基础兽医

水蛭可以携带非瘟病毒达140天

日期:07-26 作者:勾红潮- 小 + 大

       近日,最新发表在著名国际期刊《Veterinary Microbiology》上的一项研究发现,非洲猪瘟病毒在水蛭体内存活可达140天。

已有研究表明,ASFV可通过水源传播。截止目前,水被ASFV污染的源头仍不清楚,其中一个可能的因素是感染猪的粪便和尿液。然而,在没有合适寄生物的情况下,ASFV在水中存活时间一般只有数天,是不可能在水中长期存在的。因此,寻找可以携带和传播非洲猪瘟病毒的水生生物显得非常必要。在自然环境中,水蛭是细菌、病毒、寄生虫的重要宿主。早在1913年,Boynton等已发现它在牛瘟的传播中具有重要作用。后续研究也发现,水蛭是动物病毒的跨宿主传播的载体之一。该研究对水蛭携带和分泌ASFV的能力进行了检测,并对水蛭分泌的ASFV的感染能力进行了分析。

一、实验分组

将水蛭分为两组。第一组的96条水蛭进行ASFV的携带研究。在猪感染ASFV 6天左右,让水蛭在感染猪的下腹部吸食血液,因为这个时期血液中的病毒载量相对较高。通过人为摘除,控制水蛭的吸食时间为10 min左右。同时用10条吸食过人血液的水蛭作为实验对照。第二组的96条水蛭用来进行ASFV的培养研究。将感染猪的脾脏提取物进行稀释后,以4.0 lg HADU₅₀/ml ASFV的浓度对该组水蛭进行饲喂。同时用10条未进食的水蛭作为实验对照。模拟夏季的环境温度,该研究中水蛭的培养条件为22℃–25℃ 80天,26℃–32℃ 60天,24℃–26℃ 60天。

二、实验结果

通过检测水蛭的体液分泌物,该研究确认了两组的水蛭均携带了ASFV。在无水蛭的水环境对照中,HADU检测结果显示,ASFV在培养液中的失活与温度密切相关。30℃避光条件下,ASFV可至少存活12-14天,最长可达30-35天 (1 A)。PCR结果显示,ASFV DNA在水环境中可存在至少3-5周(1B)。在水蛭实验组,HADU结果显示,直到160天,有50%的水蛭体内仍可检测到ASFV(表2)。HADU结果显示,我们发现实验开始阶段血液吸食组水蛭体内的病毒含量高于脾脏提取物培养组。60-80天后,血液吸食组水蛭体内的病毒含量开始下降,但一直持续至160天左右(1C)。PCR方法与HADU方法的结果基本一致,ASFV DNA在血液吸食组水蛭体内可存在150-160天,在脾脏提取物培养组水蛭体内可存在140-150天(1D)。在水蛭实验组的培养液中,虽然ASFV滴度随培养时间延长有所下降,但直到实验结束,通过HADU和PCR方法均能检测到ASFV的存在(1E和1F)。另外,结果显示培养液沉淀物中的病毒拷贝数要明显高于培养液。

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