禽病
鹅大肠杆菌病的防治（二）
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4.4 致病性试验 将生化反应中符合大肠杆菌特性的纯化菌株，接种营养肉汤，37℃培养16-18 h，用灭菌生理盐水稀释所需浓度，可用小白鼠或10～15d雏鹅作为供试动物，分设攻菌试验组（注射菌液）和空白对照组（注射生理盐水），观察发病和死亡情况，剖检观察病变，进行细菌分离，对新分离的细菌进行菌落形态对比及生化试验，从而判断从病鹅分离出的大肠杆菌是否具有致病性。 4.5 分子生物学鉴定 16S rRNA基因为所有细菌共有，以其在进化上的特征性序列，现已被广泛用于细菌分类和鉴定的分子指标。细菌16S rRNA基因由可变区和保守区交替组成，保守区在所有细菌中高度一致，而可变区则因菌种的不同而有较大的变化。所以，16S rRNA既可作为细菌分类的标志，又可作为临床病原菌检测和鉴定的靶分子。以分离菌株的基因组DNA为模板，用细菌16S rRNA基因的通用引物进行PCR扩增分离菌的16S rRNA基因，PCR产物进行1%琼脂凝胶电泳，回收的目的片段与T载体连接，连接产物转化大肠杆菌DH5α，筛选阳性克隆菌进行测序，测序结果经BLAST进行序列比较，同源序列分析，并构建遗传进化树，李永锋等根据Matsuki的研究，提出16S rRNA序列的同源性大于97%，便可认为是同一种细菌。 5 防治措施 5.1 加强饲养管理 大肠杆菌可存在于饲料、饮水、灰尘等，据研究禽舍灰尘中大肠杆菌含量可达105～106个/g。当冬季为保温而封闭饲养时,会造成通风不良，加上饲喂时往往拍飞而产生浮尘，因此，保持鹅舍卫生清洁，定期消毒，合理通风，采取措施减少与降低浮尘，饲养密度合理，饮水要清洁，减少应激因素，供给营养适宜饲料，禁喂霉变饲料，执行“全进全出”的饲养制度，可有效预防鹅大肠杆菌病。 5.2 加强种蛋管理 发病的种鹅一律淘汰，破损明显的种蛋淘汰，选择蛋重大小适中，蛋形正常，蛋壳厚薄均匀的受精蛋作种蛋。种蛋的消毒非常重要，有的种鹅所产蛋虽不带菌，但由于蛋壳表面沾污带有大肠杆菌的粪便，未经清洗和消毒，细菌在种蛋保存期或孵化期侵入蛋内部，可引起死胚或雏鹅成活率下降，消毒的种蛋比不消毒的种蛋孵化率明显提高，因此，采取对种蛋产后24h进行熏蒸或消毒的办法控制大肠杆菌的感染。 5.3 免疫预防 做好免疫接种工作，使用大肠杆菌多价疫苗免疫接种，能起到预防效果。由于大肠杆菌血清型多，且不同菌株之间不产生交叉保护作用，因此采用分离菌株制备自家苗进行预防接种是防治疾病可行且有效的方法。雏鹅可于7～10日龄接种疫苗，种鹅2月龄时进行二免，开产前15～20日进行三免，以后每隔半年免疫1次。 5.4 药物防治 大肠杆菌对抗生素容易产生耐药性，多重耐药现象严重，建议交叉用药，尽量避免产生耐药性。有条件的养殖场可通过实验室对致病性细菌进行分离鉴定和药敏试验，筛选敏感药物，为临床用药提供依据，防止盲目用药，是提高经济效益，减少耐药性的有效方法。 5.5 中药防治 随着我国经济的快速发展，人们对畜禽肉类、蛋类等食品的需求越来越多，养殖场为了满足市场需求，大量使用抗生素，导致耐药性及药物残留问题严重。抗生素的严重滥用，不仅使疾病的治疗因耐药性棘手，而且食品安全问题也越来越严重。近年来提倡无抗养殖，即在畜禽饲养的全过程中，使用完全不含抗菌药物（含抗生素）、激素类药物、防腐剂等药物的饲料通过不同的中药对不同时期的疾病进行预防，并利用中药促进畜禽生长、改善肉质。中药由于具有低残留、低毒性和不易产生耐药性等特点，越来越受养殖业接受。实验表明，许多中药具有抗菌、抗病毒和增强机体免疫力的作用。资料报道，锦心口服液具有显著抗菌、消炎作用，在饲料中添加黄连解毒散可以治疗大肠杆菌，白头翁、黄连、贯众、板蓝根和大青叶等组成的中药处方对大肠杆菌病有良好的治疗效果。 6 小结 大肠杆菌病是常见的细菌病，在动物间广泛流行，它携带的耐药基因通过食物链等方式传给人类，危害食品安全和人类健康。防重于治，预防免疫是控制大肠杆菌病的有效措施。而针对耐药情况严重，可采用以下措施：第一、开展动物源性细菌耐药性的监测，定期采样，分析其耐药性变化，及时更改药物或改变原有药物剂量，以减少病情的传播。第二、加强兽药管理，严重耐药的药物停止使用，中度耐药的药物调整药物的使用浓度，或交替使用抗菌药物。第三，开发新的抗菌药物和中药制剂，有效控制日趋严重大肠杆菌耐药性问题。 |
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