口岸截获猪肉肠的主要猪病病原核酸检测
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摘要：为了解非法跨境携带猪肉肠传播动物疫病的风险，对北京口岸截获的猪肉肠进行8种猪病病原核酸的检测分析。结果显示:282份样品中，猪圆环病毒2型(PCV-2}、猪细小病毒(PPV）、猪伪狂犬病毒(PRV)以及猪细环病毒1型(TTSuVl)均有检出；除PRV阳性率较低外(3.9%），其余3种阳性率较高，均大于35%。这表明口岸非法携带猪肉肠存在传播多种动物疫病的风险，提示相关执法邵门应强化口岸动物检疫，降低授病传入风险。 根据《中华人民共和国禁止携带、邮寄进境的动植物及其产品名录》规定，(生或熟)肉类(含脏器类)及其制品，均属于禁止携带、邮寄进境物。从境外携带的动物产品，由于其原料信息、制作工艺不明，存在散播动物疫病风险，一旦接触易感动物，很有可能引起动物疫情。但近年来非法携带动物产品屡禁不止，给我国动物疫病防控带来巨大风险。随着猪肉及其制品国际贸易的发展以及进出境旅客的非法携带，猪病病原跨境传播风险也随之加剧。例如从2007年开始，非洲猪瘟从撒哈拉沙漠以南传遍整个东欧，2018年又从高加索地区传入亚洲多个国家，引起多国非洲猪瘟暴发和国际贸易限制。此外，近十多年来，频发的食品安全问题使得世界各国对食品安全十分关注。而一些猪病病原还会引起公共卫生问题，例如2009年的H1N1亚型猪流感，经溯源表明其来源于猪群中流行的毒株。 根据我国与其他国家的双边贸易协定规定，口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)，猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(porcinereproductive and respiratory syndrome disease virus,PRRSV)，猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)，猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2, PCV-2)，猪流感病毒(swine influenza virus,SiV，猪细小病毒(porcine parvovirus, PPV，伪狂犬病毒(pseudorabies virus, PRV)，猪细环病毒1型和2型(torque teno sus virus 1 and 2 ,TTSuVl and TTSuV2) 8种病毒，被列为进出境可能通过猪肉传播的检疫对象。FMDV, CSFV和PRRSV为可严重危害养殖业的重大疫病，已被世界各国列为重点防控对象。而SIV, PRV, PCV-2,PPV以及TTSuVl和TTSuV2为分布范围较广的病原，从肉制品中检出的可能性较高。为了解非法跨境携带猪肉肠传播动物疫病的风险，从而为执法部门的监督管理提供数据支持，本文以北京口岸截获的猪肉肠为研究对象，选取282份样品进行了8种猪病病原核酸的检测分析。 1 材料与方法 1.1样品 样品均为口岸截获的猪肉肠核酸样品，-80°C冰箱保存。按照猪肉肠接收时间将样品分为“前段 ( 2018年11-12月)、中段(2019年1-2月)和末段(2019年3-4月)”，从每个时间段样品中随机抽取94份，共抽取282份核酸样品。样品主要来自25个国家的航班，其中欧洲16个、非洲7个、亚洲2个，另有3份样品来源国未知。具体猪肉肠样品来源信息见表1。 表1 猪肉肠样品来源信息统计 1.2 设备与试剂 荧光PCR仪、Roche 480:美国Roche公司产品;AB QuantStudioTMS:美国Thermo Fishe:公司产品;病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒:天根生化科技有限公司产品;引物、探针:生工生物工程股份有限公司合成;M-MLV反转录酶、RNA酶抑制剂:Promega公司产品;Ex Ta犷Hot StartVersion, dNTP; TaKaRa公司产品。 1.3 检测方法 8种病原的检测方法主要是荧光PCR、荧光RT-PCR，均依据相关国际/国家标准或规范进行，具体见表2。 |