恒温PCR技术在非洲猪瘟检测中的应用（视频）

常用实验室检测技术包括普通PCR、荧光定量PCR、恒温PCR在内的分子生物学检测技术，以及包括ELISA、试纸条在内的免疫学检测技术。其中，分子生物学检测技术特异性强、灵敏度高，操作简单，产品开发容易；而免疫学检测技术特异性强、简单快速，但产品开发难度大。

普通PCR方法就像是分子检测中的胶卷相机，是将样品核酸模板与PCR试剂混合并反应后，将扩增产物取出进行凝胶电泳实验，通过凝胶成像分析条带大小来判断样品中是否含有靶标基因。荧光定量PCR方法就像分子检测中的单反相机，是使用实时PCR扩增装置实时监测PCR扩增产物并进行分析的方法。而恒温PCR方法就像分子检测中的卡片机。其应用环介导的等温扩增技术，针对靶基因6个区域设计的两对特殊设计的引物和具有链置换活性的DNA聚合酶，在等温条件下进行扩增反应。它的反应特点有：

1、恒温检测——只需要一个恒定温度完成扩增反应；

2、快速高效——没有反复变性退火，反应在30~60分钟内完成，扩增109~1010倍靶序列拷贝；

3、特异性高，由4条引物靶向6个区域；

4、闭管检测，可防止由扩增产物产生的污染。

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