思考3:gB抗体合格率几乎都是100%,而且抗体值比较高,为什么还不能阻止野毒的感染? 2018年某规模化猪场伪狂犬抗体检测结果分析
上图为某规模化猪场伪狂犬gB抗体、gE抗体检测结果,gB各个阶段的猪只抗体合格率几乎都是100%,而gE抗体也在45.5%-100%,gB抗体虽高,依然没有阻止野毒感染。该猪场检测结果基本反映了中国猪场的现状。 在这里,很多人就很困惑了,抗体水平如此高,为什么还能发生伪狂犬或出现野毒感染呢?这也是炒作毒株变异能够让养猪场能够接受的原因(毒株变异了,抗体中和野毒感染能力变弱了,所以抗体水平虽高,但不能阻止野毒感染)。 我们需要科普的是,免疫伪狂犬疫苗,能不能保护得住伪狂犬病,需要看总免疫力水平是否足够高,不仅仅单指抗体水平多高。我们所讲的抗体主要指体液免疫产生的中和抗体,主要包括gB抗体,gC抗体、gD抗体,而gB-ELISA主要检测gB抗体,也是伪狂犬产生主要中和抗体的中和位点,所以也不能完全代表体液免疫力,除此之外,总免疫力还需要看细胞免疫、粘膜免疫水平。换一句话讲,伪狂犬免疫力=体液免疫(gB抗体+gC抗体+gD抗体)+细胞免疫+黏膜免疫。 目前检测方法,细胞免疫、粘膜免疫基本没有进行评估,如果体液免疫力高,细胞免疫力不足、粘膜免疫不足,则总免疫力依然会不高,依然会出现野毒感染,再者我们讲的体液免疫力高,主要是指gB抗体高,gC抗体、gD抗体,也是没有评估的,如果出现gC抗体、gD抗体不高,则也会出现体液免疫水平其实并不高的现象。所以会出现gB抗体合格率几乎都是100%,而且抗体值比较高,依然会出现野毒感染的现状了。 从这个角度看,免疫伪狂犬疫苗能不能保护得住野毒感染,免疫攻毒保护试验就是最好的验证方法了,因为该方法考虑到了包含体液免疫力、细胞免疫力、体液免疫力的总免疫力了。 思考4:针对各个阶段的猪只,gB抗体合格率几乎都是100%的现状,如何利用gB-ELISA方法推荐首免日龄? 如果执行现有的高强度免疫方案,我们需要解决一个问题,仔猪第一次肌注的首免日龄时间。因为由于母猪免疫次数,免疫的有效疫苗含量大幅提高,那仔猪的母源抗体势必也会比较高,母源抗体的持续时间也会变长,猪场需要什么标准确定首免日龄呢?这确实是不得不面对的现实问题,否则会出现免疫时机不合适,出现母源抗体中和疫苗毒的现象,人为造成免疫空白期,加速了伪狂病的发生。 目前检测伪狂犬母源抗体持续时间采用较多的是IDEXX公司的gB-ELISA试剂盒,但通过检测gB抗体发现,各个阶段几乎是100%,面对这种现状就很更难确定首免日龄了。 针对这种现状,如何利用gB-ELISA试剂盒指导生产呢?毕竟gB-ELISA是一种方便,快速、标准的方法,为此,很多权威机构进行过大量的摸索,也总结很多经验,其中,最能被很多学者接受的主要有两种方法,均是优化了gB-ELISA评价标准,使其更符合目前中国伪狂犬病的流行现状,这两种gB-ELISA试剂盒改进方法是: 1)可以通过血清1:40稀释检测,再执行S/N>0.7(阴性)的数量占整个检测群体20-40%为最佳免疫时间(与中和试验测中和抗体结果呈正相关)。 2)正常按照试剂盒操作,执行S/N>0.2(定为阴性,标准为0.7,提高了要求)的数量占整个检测群体20-40%为最佳免疫时间。 此两种方法,有异曲同工之妙,优化的结果,均是拉开了不同检测样品间的离散度,从而具有了区分意义,找到了合适的临界点。 |