《禽白血病净化技术规范》团体标准

4.1.3将雏鸡胎粪样品置入液氮中快速冷冻后取出，放入37℃水浴锅中融化，反复冻融三次，使禽白血病病毒p27抗原充分释放，离心取上清液用于检测胎粪中禽白血病病毒p27抗原。

4.1.4禽白血病病毒p27抗原检测，可按照NY/T 680标准或采用等效的商品化酶联免疫吸附试验  (ELISA)试剂盒进行，也可采用针对禽白血病病毒p27抗原的单克隆抗体建立的胶体金试纸条等快速检测方法。

4.1.5同一只(羽)母鸡所产的雏鸡中，若有一只(羽)雏鸡胎粪检测为禽白血病病毒p27抗原阳性，则该纸袋(纸盒)中所有雏鸡视为阳性，相应雏鸡及其对应母鸡应全部淘汰。

4.1.6 阴性鸡作为育种选留进行隔离饲养，同一母鸡的阴性雏鸡放于同一笼中。在育雏期间每个笼具之间应采取阻隔措施以避免水平传播，避免笼间直接接触和直接气流的对流。可在每个笼具之间用纸板阻隔，在不影响通风情况下纸板高度应尽量高。

4.2育雏后期的检测与淘汰

4.3.3检测为阳性的鸡应淘汰，不再作为育种选育个体。对检测为阴性的选留后备种鸡，继续维持小群隔离饲养。

4. 4留种前的检测与淘汰

4. 4. 1取每只(羽)母鸡所产种蛋2--3枚采集蛋清，检测方法同4. 3. 1 。

4. 4. 2公鸡检测方法同4. 3. 2。

4. 4. 3检测为阳性的鸡应淘汰，不再作为育种选育个体。对检测为阴性的选留后备种鸡，继续维持小群隔离饲养。

4. 5种蛋的选留和孵化

按照本标准4. 1--4. 4规定程序淘汰所有阳性鸡后，每只母鸡仅选用1只检测为阴性公鸡的精液进行人工授精。按育种规定时间留足种蛋，每只母鸡的种蛋均标号。将每只母鸡的种蛋置于写有该母鸡标号的专用孵化纸袋(纸盒)中，防止不同母鸡的种蛋直接接触，置于出雏箱中出雏。

4. 6不同世代的持续检测

经检测合格的种蛋孵出的雏鸡作为净化后第二世代鸡，继续按照本标准4. 1--4. 5规定的程序实施第二世代的检测和净化。后续世代按此程序继续循环进行，直至评估达到附录B所列禽白血病净化评估标准。

5 净化周期与终止

5. 1净化周期确定

净化时可根据种鸡所处育种时期，对照本标准4. 1--4. 5的任何一个时间节点启动净化程序。不同种鸡场可根据其技术条件分别选择本标准4. 1--4. 5的任何一时间节点进行检测，但按照本标准4. 1--4. 5从出壳开始至留种过程中所有时间节点全部进行检测是实现净化的最短周期。

5. 2净化效果评估

净化效果评估应按照国家农业行业行政主管部门制定的禽白血病净化评估程序和净化评估标准进行。净化评估标准见附录B。

5. 3达到净化鸡群的检测比例调整

对按照5. 2评估达到净化标准的原种场无需再按照本标准4. 1 --4. 5要求进行普遍性检测，可按照5. 2或不低于10%的比例进行抽样监测。检测结果不符合5. 2所要求标准，则按照本标准4. 1--4. 5所列检测规程重新进入检测净化程序。

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