非洲猪瘟究竟是什么来头？

2.实验室诊断

非洲猪瘟的实验室诊断主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)、PCR、荧光定量PCR、DNA原位杂交、免疫组织化学检测、病毒分离、动物接种等多种方法。另外, 一些新的方法正在被开发和评估, 比如检测抗原的侧流实验, 胶体金免疫层析试纸条, 检测抗体的免疫化学发光实验等等。但到目前为止, 生产实际中, 应用较多的还是Elisa、PCR以及荧光定量PCR等常用方法。PCR和ELISA方法因具有很高的灵敏度和特异性，是国际贸易中OIE指定的非洲猪瘟检测方法。 现将这几种方法进行简单介绍。

（1）酶联免疫吸附试验 (ELISA)

利用抗原抗体进行免疫反应的定性和定量检测, 其已被广泛应用于生物医学领域。一般情况下, 非洲猪瘟病毒进入猪体内, 7天后便可诱导产生较高的Ig G抗体, 当然针对不同蛋白也会出现个别差异, 但不管怎样, 该方法仍是最为快速、方便的方法。当前, 市面上尚未使用非洲猪瘟相关疫苗, 因此只要抗体检测阳性, 便可确诊为非洲猪瘟病毒感染。

（2）聚合酶链式反应（PCR）

体外扩增基因的一种方法。研究表明, 非洲猪瘟感染8小时, 便可从血液中检测到其核酸物质, 因此针对非洲猪瘟病毒保守区域设计引物, 对采集的血液或组织病料等相关物质进行DNA提取, 进行PCR反应, 可对其进行快速准确诊断。是目前ASFV最常用的实验室检测方法。

（3）荧光定量PCR

通俗讲是PCR的升级版。实时荧光定量PCR比常规PCR具有更高的敏感性和特异性, 可同时快速检测大批量样品，其更加敏感、准确。

（4）胶体金免疫层析 (GICA) 试纸条

运用双抗体夹心法原理纯化后的抗ASFV单克隆抗体制备金标抗体, 应用于检测ASFV的胶体金免疫层析试纸条。

（5）荧光抗体试验 (FAT)

可用于检测野外可疑猪或实验室接种猪的脾、淋巴结等组织压片和冰冻切片中的ASFV抗原。该方法具有快速、经济、敏感性和特异性高等优点, 但需要专业实验人员, 同时需要荧光显微镜及高质量的荧光标记抗体。因此仅作为ASFV的辅助检测方法。

（6）重组酶聚合酶扩增 (RPA) 技术

RPA是一种可以替代传统PCR的新型核酸检测技术, 该方法操作简单、反应快速、检测成本低、结果确实可靠。

（7）环介导恒温扩增 (LAMP) 技术

LAMP技术操作简单、灵敏、快速, 检测成本远低于荧光定量PCR, 且不需要特殊仪器设备, 具有较高的临床实用性。LAMP方法不需要PCR中的变性、退火步骤即可进行靶序列的循环扩增, 不但大大缩短了时间, 且使反应能够在恒温条件下进行, 无需特殊仪器设备, 肉眼判读, 可以满足基层快速诊断的需要, 非常适合于基层兽医实验室和养殖场使用。

（8）探针杂交技术

探针杂交技术检测灵敏度高, 能有效排除PCR检测过程中的非特异性结果, 省去了琼脂糖凝胶电泳步骤, 操作简便、检测迅速, 在酶标板中可批量反应, 为ASFV核酸检测方法开辟了新的途径, 但该方法的建立难度较高、操作较繁琐, 对实验人员技术水平要求较高。

非洲猪瘟发生后的症状并不具备特征性，且易与猪瘟、高致病性猪蓝耳病等疫病混淆，所以根据临床表现只能作出疑似诊断，一旦怀疑该病，应立即向当地动物疫病预防控制机构报告，报告内容应包括发生的时间、地点；感染的基本情况以及报告人和联系方式等。同时，对发病场（户）实施隔离、监控等措施。当地兽医主管部门应及时采集样品送国家外来动物疫病诊断中心（国家外来动物疫病研究中心）进行确诊。

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