非洲猪瘟的流行背景及预防控制

很多实验室检查方法都可以用来诊断。实验室诊断常检查的器官包括淋巴结、肾脏、脾脏、肺、血液和血清。病变组织可用于病毒的分离、检测。组织渗出液和血清主要做抗体检测，但也可以用来检测病毒粒子。

最方便、最安全、最常用的ASF检测方法是直接免疫荧光(DIF)、血细胞吸附试验(HA和聚合酶链式反应(PCR)。

DIF检测的是脾脏、肺、淋巴结、肾脏等组织器官的病毒抗原，检查可通过组织触片或冷冻切片进行。通过共轭免疫荧光的方法来检测ASFV。DIF用来检测急性ASF具有快速、经济和高敏感性的特点。但是，当检测亚急性或者慢性ASF时，DIF的敏感性只有40%。这种敏感性的降低可能是由于在组织中形成抗原抗体复合物，这种组织中的抗原抗体复合物能阻断ASFV抗原与标记的抗ASFV免疫球蛋白结合。

由于血细胞吸附试验(HA)的特异性和敏感性，HA一般用于较宽范围的检测，HA方法应该被用来评估疑似暴发，特别是当其他测试为否定结果时，应该用HA方法进行确诊。血细胞吸附试验是利用红细胞能吸附在体外培养的感染ASFV的巨噬细胞膜表面。在ASFV诱导的细胞病变出现前，红细胞能在巨噬细胞周围形成典型的玫瑰花环。但是，尽管HA试验是检测ASFV的最敏感的方法，但应该指出的是，一些ASFV分离株能诱导巨噬细胞的病变，而不能出现血细胞吸附现象。这些毒株可利用PCR或者DF方法检测细胞培养物进行确定。

ASFV毒株及无血细胞吸附现象和致病性较低的毒株时显示出高度的一致性、特异性和高敏感性。引物和探针都是根据病毒基因组中的高度保守区域VP72设计的。

当出现ASFV抗体时就证明被感染了，因为现在还没有行之有效的疫苗。该病急性病例引起高死亡率，在血清学确诊前大量的感染猪就会死亡。然而，在亚急性疾病，一定比例的猪从感染中恢复过来，并产生高水平的ASFV特异性抗体免疫球蛋白M(lgM能检测到4DP，lgG能检测到6~8DP1。病毒感染后抗体在体内循环的存在与病毒相同，大约持续6个月,有的在病毒感染几年后仍能被检测到。病毒进入体内早期就显现并随后持续存在的抗体，使得它们可N用于检测亚急性和慢性表现的病例。鉴于同样原大因，作为病毒扑灭计划的一部分，在实施监测策略方面发挥很大的作用。很多技术已经适用于ASF抗体的检测，但以酶联免疫吸附测定( ELISA)和兔度印迹实验最为常用。

ELISA对于大范围的ASF血清学检测是最有效的，也适用于针对该病的防控和扑灭工作。世界动物卫生组织(OE)推荐的 iELISA或商品化的cELISA方法都得到了广泛应用。保存条件较差的样品可能对 ELISA的敏感性有所影响，但是以一种重组蛋白作为包被抗原的ELSA方法不受这方面的限制。

IB是一种高度特异性、敏感性、简单易学的技术。它曾经被用来验证 ELISA试验的准确性，而且当血清样品疑似保存较差时也推荐使用这种方法。

九、免疫学

抗ASF感染的免疫机制目前还不清楚，并且开发有效疫苗的所有设想尚未成功。感染ASFV后存活下来的猪只能对所感染的相应病毒具有抗力。同理，接种了毒ASFV疫苗的猪只有在感染同源的强毒病毒时才能存活，但是，当感染异源的病毒时不能提供有效免疫保护，显然，建立保护性免疫的主要困难是缺少相应的中和抗体和病毒毒株之间的高度变异性。

早期的实验已经证明在自然感染或者是人工感染猪的血清内缺少抵抗ASFV的中和抗实际上，ASFV的特异性抗体从没有被证明过是真正意义上的中和病毒的抗体。然而，康复猪用口蹄疫疫苗免疫时能产生正常水平的中和抗体该实验证明了ASFV感染对体液免疫反应不存在负面影响。

将被ASFV感染的猪或者其他被感染动物的血清转移给其他动物并不能使其受体动物抵抗ASFV的感染。并且最近的一些实验表明，具有高度抗原性蛋白0、p54和p72的抗体没有保护性(Neln等4)。然而，注射抗体的猪能够表现出对ASFV的部分抵抗性，比如说，能够延迟临床症状的表现，能够改善临床症状，能够降低病毒血症水平，还能提高存活率。

体内外研究表明抗体在补体介导细胞溶解和抗体依赖细胞介导细胞毒性(ADCC)过程中有一定的作用。这些实验同时证明自然杀伤细胞(NK)具有重要的作用，从康复的猪中分离的细胞毒性T淋巴细胞能够破坏病毒感染的巨噬细胞，这表明在免疫过程中细胞介导的免疫起主要作用，因此，与体液免疫和与细胞免疫相关的免疫机制在抵抗ASFV感染的过程中发挥作用。

十、预防和控制

任何情况下，只要有可疑的ASF感染猪，应该限制猪及猪产品的流动，立即进行诊断，要牢记，低致病性的ASFV毒株不能通过其引起的症状或病变来证明它们的存在。

目前还没有比较有效的措施或者疫苗来对抗自1963年在葡萄牙开始尝试第一个弱毒活疫苗，已经为寻找多尝试，但一直没成功但是，经过20多年的努力，在葡萄牙和西班牙扑灭了ASFV，证明疫苗并不是净化ASF所必需。

因为ASFV引起的经济损失较大，也因为还没有控制该病的有效疫苗，所以，保护不存在sF的地区免受ASFV的侵入变得非常关键流行病学研完表明，国际机场和港口中被污染的垃圾是ASFV重要的传染源(EFSA,2010)，因此，所有飞机和轮船上剩余的食物都应该被焚烧。

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